裂殖酵母中的Monopolin复合体通过在着丝粒区招募集缩素(condensin)参与抑制merotelic连接,同时也参与调控rDNA重组。Monopolin复合体表现出TBZ和HU敏感性,猜测与上述两方面的功能缺陷有关。而核仁蛋白Dnt1同样也在一定程度上参与了染色体精确分离和rDNA重组,但两者之间是否存在功能上的互作并不清楚。我们利用TEV蛋白酶识别和切割底物的特性,在细胞内特异位置切割Monopolin复合体蛋白。通过表达可以特异定位在着丝粒区的TEV蛋白酶进而特异切割此处的Monopolin组分Mde4蛋白,发现只破坏着丝粒定位的Monopolin,会引起菌株对微管解聚药物TBZ产生很强的敏感性,导致后期细胞中落后染色体比例明显上升。但在着丝粒区的特异性切割却不会引起菌株的HU敏感性,这表明着丝粒区定位的Monopolin只负责抑制merotelic连接,而不参与rDNA重组过程。同样地,我们还表达了特异定位在核仁的TEV蛋白酶,发现在核仁区特异切割Monopolin组分Pcs1蛋白后,菌株产生了很强的HU敏感性和较强TBZ敏感性,后期细胞中落后染色体比例明显上升。通过荧光观察Pcs1-GFP信号确定,在核仁切割Pcs1后,其着丝粒定位也消失,暗示了着丝粒区的Monopolin复合体可能是由核仁转移来的。实验室前期研究显示,dnt1Δpcs1Δ和dnt1Δmde4Δ双突变体均致死,但原因并不清楚。我们发现把dnt1Δ引入着丝粒切割Mde4的背景会加强菌株的TBZ敏感性,后期细胞中落后染色体比例更高,但是对菌株的HU敏感性并没有太大影响,且细胞可以正常生长。但是当把dnt1Δ引入核仁切割Pcs1的背景会加强菌株的TBZ和HU双重敏感性,导致细胞不能正常地生长。这说明,dnt1Δpcs1Δ或dnt1Δ mde4Δ的致死效应很可能是由于染色体精确分离和rDNA重组双重缺陷导致的。综上所述,本论文主要探究了 Monopolin复合体的定位和功能的关系,并探索了 Dnt1蛋白和Monopolin复合体在有丝分裂过程中的功能关联。我们发现,裂殖酵母中的Dnt1蛋白和Monopolin复合体共同调控染色体精确分离以及rDNA重组。