镁在特异性及非特异性免疫应答中与免疫系统有着密切的关系,巨噬细胞作为免疫系统中的主要效应细胞在血管生成中的作用已被证实,但巨噬细胞源性外泌体在此过程中发挥的作用尚不明确。本课题研究了镁离子浓度(10-50 m M/L)对巨噬细胞生物相容性及免疫相关基因的调控作用,并在此基础上利用差速超速离心法提取了正常培养及镁离子刺激后的巨噬细胞分泌的外泌体。通过高分辨透射电子显微镜和纳米粒径追踪分析对巨噬细胞源性外泌体进行了鉴定,并评估了各组巨噬细胞源性外泌体对内皮细胞生物相容性及体外成血管活性的影响。具体结果如下:(1)巨噬细胞生物相容性实验表明,镁离子可抑制巨噬细胞的黏附和增殖,但对细胞骨架的组装和细胞形态无显著影响。(2)实时荧光定量PCR(RT-PCR)结果表明,随着镁离子浓度的升高,巨噬细胞M1型基因上调,M2型基因下调,说明镁离子可使巨噬细胞向M1型极化。(3)外泌体表征实验结果表明,镁离子对巨噬细胞外泌体的整体分泌量无显著影响,但高浓度镁离子刺激产生的外泌体粒径偏大。(4)外泌体摄取实验结果表明,内皮细胞对浓度为30和50 m M/L的镁离子刺激巨噬细胞后分泌的外泌体有较高的摄取速率。但是随着培养时间延长至12和24 h,内皮细胞摄取外泌体总量无显著差异。(5)内皮细胞生物相容性实验及体外成血管相关实验表明,巨噬细胞源性外泌体可抑制内皮细胞的增殖、迁移、VEGF分泌、NO合成和血管生成,并且抑制程度随着镁离子浓度的升高而增强。(6)内皮细胞RT-PCR实验结果表明,巨噬细胞源性外泌体对内皮细胞成血管相关基因具有明显的下调作用,并且下调作用随着镁离子浓度升高而增强。