【摘 要】
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目的: 探讨离体大鼠心肌缺氧/复氧不同时间点心肌组织中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)表达的变化及其意义。 方法: 1.把48只雄性SD大鼠（体重250～28
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目的: 探讨离体大鼠心肌缺氧/复氧不同时间点心肌组织中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)表达的变化及其意义。 方法: 1.把48只雄性SD大鼠（体重250～280g）随机分为四组，每组12只:对照组(sham组)、缺氧/复氧组（H/R0.5 h、1h、2h组）。大鼠称重后，用5％水合氯醛(7～8 ml/kg)腹腔注射麻醉，开腹，经下腔静脉注射肝素(1000 U/kg)抗凝，迅速开胸取出心脏，立即将其放入预先准备好的0℃～4℃K-H缓冲液中，找出主动脉，将心脏悬挂在langendorff离体心脏灌流装置上，经主动脉进行逆行灌注[1]，恒温恒压灌流，灌注液温度37℃±0.5℃，灌注压100mmHg。从左心耳向左心室插入球囊，球囊内注射适量生理压水，维持左心室舒张末期压力(LVEDP)4 mmHg～10 mmHg，通过Powerlab八通道生理记录仪连续记录各组左室发展压(left ventricular development pressure，LVDP)、左心室发展压最大上升/下降速率(maximal rates of increase/decrease of the left ventricularpressure，±dp/dtmax)和心率(heart rate，HR)的变化。 2.ELISA检测各组大鼠心肌中TNF-α和肌酸激酶同工酶(creatine kinase-MB，CK-MB)的浓度。 3.RT-PCR检测大鼠心肌中TNF-αmRNA的表达水平。 4.电镜下观察心肌细胞超微结构的改变。 结果: 1.与对照组相比，缺氧/复氧组的LVDP、±dp/dtmax、HR值明显降低(p＜0.05); H/R0.5h、H/R1 h、H/R2 h组随着灌注时间延长，LVDP、±dp/dtmax、HR的值逐渐下降，H/R0.5 h、H/R1 h、H/R2 h组间LVDP、±dp/dtmax、HR的值两两比较，差异均有统计学意义(P＜0.05); H/R2 h组与其他组相比，LVDP、±dp/dtmax、HR值达到最低（P＜0.05）。 2.缺氧/复氧组与对照组相比，心肌组织中TNF-α的含量明显增高（P＜0.05），CK-MB的浓度上升（P＜0.05）;随着灌注时间的延长，TNF-α和CK-MB的水平呈上升趋势，提示心肌损伤加重，H/R0.5 h、H/R1 h、H/R2 h组间两两比较，差异均有统计学意义（P＜0.05）;与其他组相比，H/R2 h组心肌组织中TNF-α和CK-MB的表达达到到高峰。 3.与对照组相比，缺氧/复氧组TNF-α mRNA的相对表达量显著升高(p＜0.05);随着灌注时间的延长，TNF-α mRNA的表达量呈上升趋势(p＜0.05)，H/R0.5 h、H/R1 h、H/R2 h组间两两比较，差异均有统计学意义(P＜0.05)，与其他组相比，H/R2h组TNF-α mRNA的表达量最高。 4.心肌组织电镜观察结果:对照组心肌纤维结构清晰，横纹明显，肌丝排列规则，线粒体形态正常，板层嵴密集，结构清楚;缺氧/复氧0.5h组心肌纤维走形稍紊乱，横纹不明显，线粒体开始出现畸形;缺氧/复氧1h组心肌纤维结构紊乱，横纹消失，线粒体肿胀、畸形，嵴断裂、溶解及空泡形成;缺氧/复氧2h组出现肌丝大面积的断裂、溶解，线粒体嵴肿胀十分明显。 结论: 与对照组相比后，结果显示在大鼠心肌缺氧/复氧期间，随着缺氧/复氧的时间延长，大鼠心肌TNF-α水平逐渐升高，并介导了心肌组织的损伤。
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