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第一部分:骨肉瘤NKG2D受体的检测目的:通过研究骨肉瘤患者和健康人外周血NK细胞NKG2D受体的表达情况,分析探讨骨肉瘤患者NK细胞表面受体NKG2D与骨肉瘤发生的关系及其临床价值。方法:对10例骨肉瘤和10例健康人,采用流式细胞术定量分析检测外周血NK细胞NKG2D的表达情况。结果:骨肉瘤组和正常对照组NKG2D的表达量分别为(95.10±2.97)%与(98.03±0.80)%。骨肉瘤患者NK细胞的NKG2D蛋白表达量低于正常对照,差异有显著性(P<0.05)。结论:NK细胞NKG2D表达异常与骨肉瘤的发生发展可能有关。第二部分:骨肉瘤NK细胞杀伤活性的检测机体自身的免疫功能与肿瘤的发生、发展密切相关。自然杀伤细胞是机体免疫系统中一类十分重要的淋巴细胞,它不像细胞毒性T细胞,不需预先致敏,亦无MHC限制性,在病变早期即能迅速发挥杀瘤效应,在肿瘤免疫监视中发挥着举足轻重的作用,被认为是机体免疫防御体系的第一道屏障。目前关于NK细胞功能和调节的研究引起了人们极大的兴趣,成为免疫学和肿瘤学的热点。同时,分析肿瘤逃逸现象的分子机制,对我们全面掌握肿瘤发生、发展的本质,寻找克服肿瘤免疫逃逸的方法有重要的参考价值。目的:研究骨肉瘤患者和健康人外周血NK细胞活性及NKG2D多克隆抗体(pAb)对NK细胞细胞毒作用的影响,分析探讨骨肉瘤患者NK细胞活性的变化与NKG2D表达量的关系,并进一步了解骨肉瘤发病原因。方法:分离10例骨肉瘤和10例健康人外周血单个核细胞,用MTT比色法检测抗NKG2DpAb加入前后NK细胞的细胞毒效应。结果:与正常对照组相比,骨肉瘤患者外周血NK细胞的细胞毒活性降低;NK细胞的细胞毒效应与其表面的NKG2D的表达水平密切相关。结论:骨肉瘤患者机体NK细胞的杀伤活性下降;其活化性受体NKG2D表达的下降是NK细胞活性下降的原因之一;NKG2D表达异常可能对NK细胞的功能状态起着重要的调节作用;NKG2DpAb通过封闭NK细胞表面的NKG2D分子显著抑制NK细胞的细胞毒效应;骨肉瘤的免疫逃避可能与NKG2D表达下降有关。