慢病毒载体介导分化抑制因子-1 RNAi对人涎腺腺样囊性癌生物学行为的影响

来源 :上海交通大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yi123400
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:⑴研究涎腺腺样囊性癌中Id-1的表达,并比较其和临床病理间的联系。⑵构建慢病毒载体基础上的Id-1RNA干扰系统,研究RNA干扰Id-1表达对涎腺腺样囊性癌的增殖、侵袭和转移的影响。 方法:①采用免疫组化技术、real-time PCR技术以及western blot技术研究涎腺腺样囊性癌石蜡标本和ACC-M和ACC-2细胞系中Id-1的表达,并比较其和临床病理间的联系。②通过RNA干扰技术,建立慢病毒载体基础上的Id-1RNA干扰稳定转染的ACC-M细胞株。③采用MTT、流式细胞仪、克隆形成实验和动物试验研究Id-1RNA干扰对涎腺腺样囊性癌增殖的影响。④采用Transwell侵袭实验和动物实验研究Id-1RNA干扰对涎腺腺样囊性癌侵袭和转移的影响。 结果:⑴Id-1表达在涎腺腺样囊性癌转移组和无转移组之间差异具有显著性(P<0.05);Id-1表达在涎腺腺样囊性癌临床I-II期和III-IV期之间差异具有显著性(P<0.05)。ACC-M细胞中Id-1基因和蛋白水平高于ACC-2细胞的表达。⑵限制性内切酶酶切和DNA序列测定Id-1表达载体证实,目的片段己正确插入载体且插入片段序列正确。实验证实慢病毒滴度达到107 TU/ml该病毒感染ACC-M细胞经筛选获得稳定转染细胞株,经real time PCR和Western blot分析表明,Id-1mRNA和蛋白表达水平出现了明显的敲减效应。⑶Id-1 RNA干扰后,对ACC-M细胞增殖能力无明显影响。⑷Id-1RNA干扰体外侵袭抑制率为34.12%,体内肺转移抑制率为77.64%。 结论:①Id-1的表达与涎腺腺样囊性癌的临床分期与转移密切相关。②慢病毒携带Id-1RNA干扰在体外可降低ACC-M的侵袭能力,在裸鼠体内能够抑制腺样囊性癌肺转移。③慢病毒是携带Id-1干扰RNA进入ACC-M的理想载体之一。
其他文献
一、双滚筒式过滤机它由两个与纵轴线平行排列的过滤滚筒组成,其布置方法是两个滚筒的外部表面几乎相切,造成一个恰能转动的缝隙。在滚筒的两端,使其边缘与侧壁均同样密封起
中国分类号:G633.6  为了适应时代的发展,为了培养具有创新能力的人才,全国范围展开了基础教育的课程改革。在改革的过程中涌现了一批成功的典范学校。使之大批学校也迅速跟进。高中课程改革是基础课改中相对力度较大的,参加课改的时间也是最长的,那么經过多年的课程改革,高中教学现状如何呢?就此,我们课题组进行了一次调查,具体情况如下:  一、调查目的:  掌握高中高效课堂教学模式的亮点和不足,为进一步完
期刊
东川汤丹铜矿采用直接加压氨浸流程所得的试验数据是:矿石磨细至71%为-200目,矿浆固液比1∶1,溶液中氨浓度8.5~10.2%.二氧化碳浓度5.5~6.6%,矿浆温度120~135℃,浸出时间3.2小时
江苏省宿迁市沭阳县新河镇是全国闻名的花木之乡,现有盆景、苗木、鲜花、干花四大花木产业基地。通过市场、网站、绿化公司、合作社等途径,花木销往全国各地,2013年花木产业
摘要:常规是指幼儿的行为常规,具体来说就是教师将幼儿一日活动的各个环节制定出一系列行为规范,让幼儿经常固定地执行,从而形成良好的习惯,形成科学的生活秩序。如,幼儿睡眠、起床、进餐都有固定的时间;幼儿玩完玩具后应该放回原来的地方;吃饭前要洗手;水杯应该放在贴有标志的地方等等。常规的好与坏直接影响到班级各项活动的顺利开展及幼儿的健康成长,从小重视幼儿常规培养,对其一生都有益。  关键词:小班;幼儿;常
期刊
我们以往评价一个媒介集团,通常以赢利多少作为唯一的标准。比如谈论某报业集团,往往只是注意其一年的利润是多少。某些媒介集团在人们的印象中,应当是利润大户,但是突然间,
【摘要】针对电气类专业的特点,剖析了工程实践能力的内涵,提出了电气类创新人才工程实践能力培养的实现途径,分析了不同途径对工程实践能力培养的影响。从人才培养方案、师资队伍建设、实验实训条件、实习基地建设等方面阐述了工程实践能力培养的保障措施。  【关键词】电气类;创新;工程实践能力;人才培养  中国分类号:F416.6  本文得到2013年湖南省普通高等学校教学改革研究项目《基于“卓越工程师培养培养
期刊
利用AREM(-YW and SY)、 T213L31、 JAPAN 三个模式对2008年夏半年(5~11月)西南地区(25°~34.5°N,97°~110.5°E)降水预报进行了统计检验,并对其中两次强降水过程的预报效果进
摘要 探索循证医学模式在外科腹痛本科实习生临床教学中的教学效果,强化学生对外科腹痛诊疗思路的理解,提高临床教学效果。  关键词:循证医学;外科腹痛;  中国分类号:K826.2  基金项目:南华大学教改课题(2012FS037)  循证医学(evidence based medicine,EBM)是指以证据为基础的医学,是近年来国际上在临床医学领域迅速兴起的一种新体系。外科腹痛是指以急性腹痛为主要
期刊
本文就攀枝花选钛厂原设计工艺流程在试生产中暴露出来的问题作了分析,并对其进行了工艺流程简化与技术改造。调试结果表明,简化改造后的工艺流程是合理的,技术改造基本上是