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[目的]动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)发病机制复杂,已成为我国首位人口死亡原因之一。动脉壁脂质沉积、泡沫细胞形成等,在As的发生发展中起着重要作用。脂蛋白脂酶(lipoprotein lipase,LPL)是水解血浆中乳糜微粒(chylomicron,CM)、极低密度脂蛋白(very low density lipoprotein,VLDL)等脂蛋白中甘油三酯的关键酶,在脂质代谢中发挥着重要作用。动脉壁中巨噬细胞分泌的LPL具有促进巨噬细胞脂质蓄积的作用,导致泡沫细胞的形成及动脉粥样硬化的发生发展。罗希土碱(rohitukine,RH),是一种色原酮类生物碱,具有抗癌、抗炎、免疫调节的等生物活性,最新研究显示,其具有抑制脂肪细胞分化的作用。本研究目的在于探讨罗希土碱对巨噬细胞LPL的表达及细胞内脂质蓄积的影响。[方法]RAW264.7巨噬细胞经不同浓度(0,5,10,20 u M)罗希土碱处24h及20u M罗希土碱处理不同时间(0,12,24,48h)后,Western blot检测LPL蛋白水平,RT-PCR检测LPL m RNA水平,试剂盒检测LPL活性。20u M罗希土碱与50mg/ml LDL共孵育RAW264.7巨噬细胞24h后,酶法定量检测细胞内甘油三酯(triglyceride,TG)及总胆固醇(total cholesterol,TC)水平,油红O染色法检测巨噬细胞脂滴形成情况。20u M罗希土碱处理RAW264.7巨噬细胞24h后,Western blot(WB)检测磷脂酰肌醇-3激酶磷酸化水平(p-PI3K)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白磷酸化水平(p-m TOR)、PPARγ蛋白水平。外源性加入PPARγ激动剂后,检测LPL蛋白水平、LPL m RNA水平及LPL活性。外源性加入m TOR激动剂后,检测LPL、PPARγ蛋白水平、LPL m RNA水平及LPL活性。外源性加入PI3K激动剂后,检测LPL、p-m TOR、PPARγ蛋白水平、LPL m RNA水平及LPL活性。免疫共沉淀检测巨噬细胞低密度脂蛋白受体(LDLR)与LPL结合情况。[结果]罗希土碱呈剂量和时间依赖性下调RAW264.7巨噬细胞LPL的表达(蛋白及m RNA水平)及活性,进而减少巨噬细胞LPL介导的细胞内脂质蓄积,细胞内脂滴明显减少,TG及TC含量下降。进一步实验显示,罗希土碱可抑制p-PI3K、p-m TOR及PPARγ的表达。外源性分别加入p-PI3K、p-m TOR及PPARγ的激动剂,罗希土碱抑制巨噬细胞LPL表达及活性的作用均被削减。罗希土碱处理后,巨噬细胞LDLR与LPL的结合减少。[结论]罗希土碱通过PI3/m TOR/PPARγ信号途径降低巨噬细胞LPL表达及活性,并减少巨噬细胞上LDLR与LPL的结合,从而减少巨噬细胞LPL介导的细胞内脂质蓄积。