天葛降糖片的制备及初步药效学研究

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糖尿病(DM)是由环境和遗传因素共同作用而引起的一组糖代谢异常疾病。长期的高血糖导致眼、心、肾等组织慢性损伤、功能障碍。本研究中的处方为临床经验方(丸剂),由葛根、天花粉等六味中药材组成,具有养阴生津、止渴除烦、益气和中的功效。本文旨在结合传统中医药理论和现代制剂技术,优选天葛降糖片的制备工艺,进行质量控制,并对其进行初步药效学研究。1制备工艺研究葛根等六味药材的提取工艺:根据方中药材的主要有效成分(葛根素),采用高效液相色谱法(HPLC法)建立了浸膏中葛根素含量的测定方法,方法学考察结果显示专属性良好。以葛根素含量和出膏率为评价指标,采用单因素考察、正交试验,对煎煮法、乙醇回流法、乙醇超声法三种提取工艺进行优选,通过比较确定最佳提取工艺为:70%乙醇、固液比1:30(g/ml)、提取3次、提取时间1.5h/次。成型工艺:采用单因素考察、正交试验,以颗粒的流动性及片剂的硬度、崩解性、成型性等为考察指标,对辅料的种类、比例、用量进行考察,确定最佳成型工艺为:浸膏粉碎成细粉,加入L-HPC:CMS-Na(4:2)、微晶纤维素:糊精(7:1),用10%PVP醇溶液制粒,55℃干燥,整粒,过14目筛,加入0.3%硬脂酸镁,压片,即得。2.质量控制研究根据《中国药典》2015版要求,对制剂进行崩解时限、片重差异等考察,均符合规定。采用薄层色谱法对天葛降糖片中葛根等进行定性鉴别。采用HPLC法建立了天葛降糖片中葛根素含量测定方法。在室温条件下对天葛降糖片进行初步稳定性考察,结果显示三批样品在6个月内均符合规定。3.初步药效学研究采用连续2d腹腔注射(75mg/kg·d)链脲佐菌素(STZ)的方法建立糖尿病小鼠模型,试验动物随机分空白组、损伤组、天葛丸组、(天葛丸+二甲双胍)联合用药组、天葛降糖片组、(天葛降糖片+二甲双胍)联合用药组,灌胃给药11周。以生理指标(体重、脏器指数)、生化指标(空腹血糖、总胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白)、氧化指标(超氧化物歧化酶、过氧化物氢化酶、一氧化氮、蛋白质羰基、丙二醛)及组织形态分析,综合评价天葛降糖片对模型小鼠的保护效果。结果显示:天葛降糖片能够降低DM小鼠血糖水平,同时升高体重、减少饮食、减少饮水;降低小鼠血清中TC、TG、LDL-C含量(p<0.05),升高HDL-C含量(p<0.05),降低NO、PCO、MDA含量(p<0.05),升高SOD、CAT活性(p<0.05)。以上说明天葛降糖片对糖尿病小鼠具有保护作用。
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