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目的:(1)了解慢性应激对大鼠吗啡条件位置偏爱(conditionedplace preference,CPP)的影响,并确定糖皮质激素(glucocorticoid,GC)在慢性应激大鼠吗啡CPP形成中的作用;(2)了解慢性应激对吗啡诱导的纹状体fosB基因表达的影响,以及GC对fosB基因表达的影响;(3)了解慢性应激大鼠摄入吗啡后纹状体fosB启动子区组蛋白修饰情况及其与fosB表达水平、吗啡CPP的关系,以及GC对fosB启动子区组蛋白修饰的影响。方法:(1)成年SD雄鼠54只,随机分成慢性应激组、米非司酮处理组和对照组,每组18只。让大鼠适应CPP箱并评估其非自然偏爱侧。予米非司酮处理组大鼠GR拮抗剂米非司酮(20mg/kg,s.c.);予慢性应激组和对照组大鼠相应的溶剂。半小时后,将慢性应激组和米非司酮处理组大鼠放入足电击装置内,予以足电击(2mA,电流时间1秒,间隔时间9～12秒,总时间15分钟);对照组大鼠放入足电击箱内不予电击,连续7天。慢性应激结束后,各组大鼠以非自然偏爱侧为伴药侧接受小剂量吗啡CPP训练2天。然后,进行CPP测试,评价慢性应激组、米非司酮处理组和对照组大鼠对吗啡成瘾的易感性。(2)大鼠末次皮下注射吗啡2小时内,取大鼠纹状体,抽提总RNA,逆转录成cDNA,然后用SYBR Green进行荧光定量PCR分别检测大鼠摄入吗啡后纹状体fosB和管家基因GAPDH mRNA水平。用标准曲线法,以GAPDH为内参将各组大鼠fosB mRNA水平标准化,以对照组为参照比较各组之间的差异。(3)在大鼠末次皮下注射吗啡2小时内,取大鼠纹状体,用染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation,ChIP)检测各组大鼠fosB基因和管家基因GAPDH基因启动子区组蛋白修饰(组蛋白H3K4二甲基化、组蛋白H3乙酰化和组蛋白H4乙酰化)程度。通过与对照组相比,分析各实验组大鼠fosB启动子区和GAPDH启动子区组蛋白修饰的差异。结果:(1)慢性应激组和米非司酮处理组CPP测试值与各自训练前CPP基值相比均延长(P=0.000,P=0.017),对照组无明显延长(P=0.289)。慢性应激组的CPP差值(359.4±132.1,n=12)较米非司酮处理组(68.2±83.6,n=12)和对照组(21.7±67.8,n=12)均高(P=0.000,P=0.000),而米非司酮组CPP差值与对照组相比无统计学差异。(2)慢性应激组(3.35±0.51,n=6)纹状体fosB基因mRNA表达水平较米非司酮处理组(1.86±0.58,n=5)和对照组(1.01±0.22,n=6)明显高(P=0.001,P=0.000)。米非司酮处理组比对照组高,存在统计学差异(P=0.027)。(3)纹状体fosB基因启动子区组蛋白H3和组蛋白H4乙酰化水平:与对照组相比,慢性应激组大鼠纹状体fosB基因启动子区组蛋白H3乙酰化(1.04±0.65,n=5)和组蛋白H4乙酰化(0.95±0.24,n=5)水平无明显变化;GAPDH启动子区组蛋白H3乙酰化(1.02±0.53,n=5)和组蛋白H4乙酰化(0.95±0.35,n=5)水平无明显差异。纹状体fosB基因启动子区组蛋白H3K4二甲基化水平:慢性应激组大鼠纹状体fosB基因启动子区组蛋白H3K4二甲基化(3.58±1.01,n=5)水平明显较米非司酮处理组(1.23±0.70,n=5)和对照组高(1.01±0.18,n=5)(P=0.003,P=0.004)。米非司酮处理组和对照组之间无统计学差异。三组大鼠纹状体内GAPDH启动子区组蛋白H3K4二甲基化水平无明显差异。结论:(1)慢性应激促进大鼠吗啡CPP的形成;GR受体拮抗剂米非司酮能明显降低慢性应激对大鼠吗啡CPP的促进作用。GR激活是慢性应激促进吗啡成瘾的机制之一。(2)慢性应激促进纹状体内吗啡所致的fosB基因的表达:GR受体拮抗剂米非司酮能在一定程度上降低慢性应激对吗啡所致fosB基因表达的促进作用。纹状体fosB表达上调是慢性应激促进吗啡成瘾的机制之一,活化的GR可能参与了fosB基因表达的调控。(3)慢性应激大鼠吗啡暴露后纹状体fosB基因启动子区组蛋白H3K4二甲基化程度升高,与fosB基因mRNA水平正相关;GR受体拮抗剂米非司酮能在很大程度上抑制纹状体fosB基因启动子区组蛋白H3K4的二甲基化。这提示活化的GR可能通过提高fosB基因启动子区组蛋白H3K4二甲基化水平促进fosB基因的表达。