人胚胎干细胞和兔胚胎干细胞的建系与鉴定

来源 :中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所 中国科学院上海生命科学研究院 | 被引量 : 6次 | 上传用户:chaizw
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  本实验室利用临床多余的囊胚进行人胚胎干细胞建系研究,首先用链蛋白酶消化以去除囊胚的透明带,然后直接机械分离出内细胞团,接种到饲养细胞层上,在hES细胞培养液中进行培养。一共成功建立了7个hES细胞系,其中6个细胞系来自体外受精囊胚,分别命名为SH4、SH28、SH35、SH38、SH39和SH42;1个细胞系来自卵胞浆内单精注射产生的囊胚,命名为ICSI-ES。   根据hES细胞系的公认的鉴定标准,我们对这些新建立的细胞系各项特征进行了检测。这些hES细胞在体外能长期稳定增殖,表达碱性磷酸酶活性,表达hES细胞特异的标志物Oct-4、TDGF、Sox2、LeftyA、Thy-1、FGF4、Rex1、SSEA-3、SSEA-4、TRA-1-60、TRA-1-81。除了SH28和ICSI-ES外,其他5株在体外能形成包含三个胚层来源分化细胞的类胚体。除了SH4、SH28和ICSI-ES外,其他5株在免疫缺陷鼠体内能形成包含三胚层来源组织的畸胎瘤。其中SH35经过单细胞克隆化,产生一个hES细胞亚系,仍保持hES细胞的各项特征,具有与SH35细胞相同的生长形状,体外分化能形成类胚体,体内分化能在免疫缺陷鼠体内能形成包含三胚层来源组织的畸胎瘤。
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