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随着工业的发展，石油等化石燃料的消耗不断增加，以此同时给环境带来的污染越发严重，多环芳烃作为主要的污染物之一对生物的毒性最大。除去环境中的多环芳烃最好的方法就是微生物降解。本研究从实验室保存的一株能高效降解多环芳烃的多食鞘氨醇杆菌SWH-2中克隆出环羟基化双加氧酶大亚基的编码基因，并进行测序。将获得的基因通过基因工程技术转化到SWH-2的染色体DNA中，完成对SWH-2的遗传改造，得到一株新菌株SWH-21。降解实验表明SWH-21对多环芳烃的降解能力高于SWH-2。本实验还研究了SWH-21对石油污染土壤的修复情况。本课题主要研究成果如下：1．根据GeneBank上已有的环羟基化双加氧酶大亚基的编码基因序列，设计了一对简并引物。根据该引物的Tm值和GC含量，选择合适的PCR条件进行PCR，成功扩增出环羟基化双加氧酶大亚基的编码基因，并将该基因成功连接到pMD-18载体上，完成转化。2.将环羟基化双加氧酶大亚基的编码基因与自杀性质粒put-km1连接，成功构建出重组自杀性质粒，并成功转化入大肠杆菌DH5α—λpir。3.通过三亲杂交技术成功将环羟基化双加氧酶大亚基的编码基因整合到SWH-2菌的基因组中，完成了SWH-2菌的基因改造，得到了基因工程菌株SWH-21。分析对比了SWH-21菌与SWH-2菌对菲及石油的降解能力。其中SWH-21菌10天对菲的降解率高达64.32%，比SWH-2菌高出22.86%。4.将SWH-21菌与SWH-2菌应用到石油污染土壤的生物修复中，分析对比了这两种菌对石油污染土壤的修复情况，得出SWH-21与SWH-2对石油污染土壤的修复能力大致相同。