目的:本文旨在观察健脾清化方对湿热型HBV相关慢加急性肝衰竭患者体外T细胞分化的影响及细胞上清液中TNF-α、IFN-γ、IL-18、IL-10影响,以探讨健脾清化方治疗湿热型HBV相关慢加急性肝衰竭的免疫作用机制,从而为中医药治疗肝衰竭提供理论依据。方法:本研究提取20例HBV相关慢加急性肝衰竭且中医辨证属湿热型患者外周血单个核细胞,经贴壁分选后提取出悬浮的淋巴细胞,分别应用健脾清化方大鼠含药血清和空白对照组大鼠血清体外培养,并收集淋巴细胞和细胞上清液,用流式细胞仪检测T细胞亚群的变化,ELISA定量检测细胞上清液中细胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-18、IL-10的水平变化,观察比较健脾清化方含药血清组、空白血清组免疫细胞及细胞因子的差异。结果:1.含药血清刺激细胞后,CD3+、CD4+百分比较空白血清组上升,CD8+百分比较空白血清组下降,CD4+/CD8+比值较空白血清组上升,差异具有统计学意义(P=0.000<0.05)。2.含药血清刺激细胞后,细胞上清液中TNF-α、IFN-γ、IL-18水平呈下降趋势,IL-10水平呈上升趋势,两组细胞上清液中TNF-α、IFN-γ、IL-18、IL-10水平差异有统计学意义(P=0.000<0.05)。结论:1.健脾清化方可提升CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比值,下调CD8+百分比,提示健脾清化方可整体调节患者细胞免疫失衡状态。2.健脾清化方可降低慢加急性肝衰竭患者外周血淋巴细胞上清液中TNF-α、IFN-γ、IL-18水平,提高IL-10的水平,提示健脾清化方可能通过改善Th1/Th2比值失衡状态,从而达到减轻肝脏损伤程度、延缓病情发展的目的。