磺胺类药物(Sas)是一类广谱抗菌药，临床上主要用于预防和治疗细菌感染性疾病，还常作为饲料添加剂在动物生产中长期使用，但其在动物性食品中的残留及其对人类健康所造成的危害日益为人们重视。因此，建立一套灵敏、快速的检测方法就尤为重要。常规理化分析方法虽然具有灵敏度高、可定性、定量检测等优点，但是在实际样品应用中，样品前处理过程复杂，分析速度慢，加之需要昂贵、精密的实验仪器和专业技术人员操作，使得分析成本高，难以满足高通量和现场快速检测的要求。以抗原抗体特异性反应为基础的免疫分析方法为兽药残留的检测开辟了一条新途径，它具有预处理简单、灵敏度高、快捷、高通量、可定性定量检测等诸多优点，自上世纪80年代末开始应用于兽药残留的检测，目前已建立了针对多种兽药残留的分析方法，并有相应的检测试剂盒问世。该法的推广应用从根本上解决了户外兽药残留快速、实时、准确分析的问题，对环境污染的监控、维护人类健康、扩大农畜产品进出口贸易等都具有深远的意义。 本研究采用戊二醛法将磺胺二甲嘧啶与载体蛋白交联，鉴定后将其免疫Balb/c小鼠，随后以常规细胞融合方法制备了特异的抗磺胺二甲嘧啶抗体；建立了磺胺二甲嘧啶竞争性酶联免疫吸附检测法(Enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)，确定了校正曲线的动力学范围；对磺胺二甲嘧啶的ELISA分析方法进行交叉反应实验；对缓冲液中离子强度、pH值、有机溶剂含量对icELISA法的影响进行了分析；向牛奶、蜂蜜和猪尿样本添加磺胺二甲嘧啶标准品，分别计算它们的平均回收率来判定ELISA检测方法的可行性。 实验结果如下：(1)成功交联了磺胺二甲嘧啶与载体蛋白；常规方法免疫小鼠并制备杂交瘤细胞株，获得了两株抗磺胺二甲嘧啶的单克隆抗体，且具有效价高，特异性好等特点；(2)探讨了几种理化因素对竞争性ELISA的影响：pH为7.4时OD值最高，pH在5.0-8.5范围内对OD值和IC50影响较小。离子强度过高会导致IC50的增加，离子强度低对IC50和OD值影响较小。当甲醇含量低于30％时，反应几乎不受影响，IC50和Odmax无明显变化，当甲醇含量达到50％时，Odmax显著降低，IC50则无法测出。因此，后续实验我们选择0.02M、pH 7.4磷酸盐缓冲液(Phosphate buffered saline，PBS)作为ELISA的缓冲体系；(3)建立了磺胺二甲嘧啶的竞争性ELISA，其IC50为0.344ng/ml，灵敏度为0.1ng/ml，动力学校正曲线范围为0.1-8.1 ng/ml；(4)对牛奶、蜂蜜、猪尿进行添加回收实验，回收率分别为86-110％、93-116％、89-112％，结果证明该ELISA检测方法可用于实际样品的检测。 本研究制备了高质量的单克隆抗体，为ELISA试剂盒的研制提供了良好的原材料。