二十二碳六烯酸(DHA)联合顺铂(DDP)在体内对胃癌的促凋亡作用及机制的探讨

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二十二碳六烯酸(DHA)是ω-3不饱和脂肪酸家族中的重要成员,是一种对人体非常重要的多不饱和脂肪酸,对抗感染、增强免疫力、改善认知障碍等方面均具有重要作用,是脑和精子正常生长发育不可缺少的组分。  近年来的研究表明DHA对多种恶性肿瘤均具有抑制作用,越来越多的研究者利用细胞培养和实验动物实验等方法去探索DHA抗肿瘤的作用。研究表明DHA能选择性杀伤肿瘤细胞,而对正常细胞的影响较轻,其作用机制涉及对肿瘤细胞增殖、凋亡和分化的诱导,对环氧化酶的抑制和脂质过氧化的影响,对抗癌免疫功能的调节,对恶液质因子压制等方面,并有助于增强经典抗肿瘤药物的作用,达到增强抗癌作用、降低毒性、解决耐药等目的。肿瘤病人接受DHA复合物治疗后体重增加,癌性恶病质得到改善,生存时间延长。  胃癌在全世界范围内是常见的恶性肿瘤,发病率逐渐增加,且发病的年龄范围正在进一步扩大,年轻患者越来越多而且青年人胃癌恶性程度高,变化趋势复杂化。手术是胃癌主要和传统的治疗手段。但是胃癌术后患者及晚期患者可能面临着耐药、营养不良、免疫功能障碍等问题。DHA的摄入不仅能改善病人恶液质状态,还能提高免疫力,协同化疗或放疗增强抗肿瘤作用。  本研究通过建立荷瘤小鼠模型,观察DHA联合DDP对胃癌移植瘤及荷瘤小鼠的影响,进而观察对肿瘤细胞凋亡的影响及对CyclinD1及Caspase-3基因表达的影响,从而探讨DHA在胃癌治疗中的作用,进一步为临床应用提供依据。  目的:研究DHA与DDP分别对胃癌裸鼠移植瘤凋亡的影响,进一步研究对CyclinD1、caspase-3的影响,探讨其可能的机制。  方法:将28只BALB/c裸鼠腋下接种0.2mL(1×106个细胞)人胃腺癌细胞MGC-803细胞悬液,建立人胃癌裸鼠移植瘤模型,成瘤后动物随机平均分成4组:对照组(腹腔注射生理盐水,2次/w;生理盐水灌胃,2g/kg,1次/d)、DHA组(腹腔注射生理盐水,2次/w;DHA灌胃,2g/kg,1次/d)、DDP组(腹腔注射DDP,3mg/kg,2次/w;生理盐水灌胃,2g/kg,1次/d)、联合组(腹腔注射DDP,3mg/kg,2次/w;DHA灌胃,2g/kg,1次/d),共治疗2周。于接种后24天采用颈椎脱臼法处死全部小鼠,将小鼠腋下肿瘤组织取下。每亚组随机取5个移植瘤标本,并制成石蜡标本,利用TUNEL法检测各组标本的凋亡情况,并利用RT-PCR检测剩余各标本中CyclinD1及caspase-3的表达情况。  结果:DHA联合DDP组凋亡率高于其余三组(P<0.05),DDP组凋亡率高于DHA组及空白对照组(P<0.05),而DHA组凋亡率高于空白对照组(P<0.05)。DHA联合DDP组、DDP组、DHA组中caspase-3的mRNA表达量高于空白对照组(P<0.05);DHA联合DDP组caspase-3的mRNA表达量高于DDP组及DHA组(P<0.05);DDP组caspase-3的mRNA表达量与DHA组无明显差别(P>0.05)。DHA联合DDP组、DDP组、DHA组中CyclinD1mRNA的表达量均低于空白对照组(P<0.05);DHA联合DDP组的表达量低于DDP组及DHA组(P<0.05);DDP组中CyclinD1的表达量与DHA组无明显差异(P>0.05)。  结论:DHA与DDP使荷MGC-803细胞的BALB/c裸鼠细胞移植瘤模型的凋亡增加。在人胃癌细胞MGC-803中,DHA联合DDP可能通过上调caspase-3的表达,下调CyclinD1的表达从而增加肿瘤细胞凋亡。DHA可能对DDP起化疗增敏作用。
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