共振光散射法研究rhBMP-2/DSS/CS纳米微球缓释作用

来源 :广东工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sunwenjun19841120
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近年来微球控释技术的发展和人工可降解材料及其复合材料的不断涌现,为活性细胞因子的可控缓释和人工骨成骨提供了前所未有的机遇和条件。针对人工骨成骨诱导活性缓释微球的研究,国内外很多学者利用高分子合成与结构控制技术制备了BMPs缓释微球,取得了良好的成骨效应。共振光散射及其相关技术是二十世纪90年代发展起来的一种新兴的分析技术,在研究生物大分子识别、组装和聚集时出现灵敏而丰富的信号,已成为研究生物大分子的一种十分有用的手段。本论文主要以共振光散射光谱(RLS),并结合荧光光谱以及紫外吸收光谱来研究重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2),葡聚糖硫酸钠(DSS),壳聚糖(CS)之间的的相互作用。因此,本论文主要对重组人骨形态发生蛋白-2/葡聚糖硫酸钠/壳聚糖纳米微球的缓释作用进行研究。主要研究内容如下。研究了壳聚糖/葡聚糖硫酸钠聚电解质复合过程。结果表明在DSS/CS质量比率低时两种高分子的相容性很好,呈现均匀稳定的复合胶体溶液。RLS强度在外界条件刺激时会发生急剧的变化,其中,当溶液pH值逐渐增大时,体系的RLS强度逐渐减弱。Zn2+离子的加入则不仅会增强体系的RLS强度而且还诱导CS/DSS复合物稀溶液出现胶束-聚集转变行为。而且计算得到了复合物在不同温度下的临界胶束浓度以及胶束形成过程的的热力学参数,热力学性质研究表明复合物形成胶束主要是焓熵双驱动的结果。研究了壳聚糖与重组人骨形态发生蛋白-2的结合作用。RLS结果表明CS与rhBMP-2分子链间的结合能力较弱。荧光光谱结果表明CS对rhBMP-2的猝灭主要是分子之间结合形成化合物所引起的静态猝灭。表观结合常数和相应的结合位点数表明CS与rhBMP-2之间的相互作用比较弱。热力学参数表明CS与rhBMP-2之间的作用力主要为范德华力和氢键。研究了葡聚糖硫酸钠与重组人骨形态发生蛋白-2的结合作用。RLS表明DSS与rhBMP-2有很强的相互作用,在酸性条件下结合能力更强。荧光光谱结果表明低浓度的DSS对rhBMP-2产生动态猝灭现象;高浓度的DSS与rhBMP-2产生荧光增强现象。表观结合常数和结合位点数得出DSS与rhBMP-2的相互作用强。吉布斯自由能,焓变以及熵变一系列热力学参数确定了DSS与rhBMP-2在溶液中主要是疏水作用。
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