补肾健脾方对裸鼠移植性肝癌术后复发及复发后肝癌组织中血管生成拟态形成的影响

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目的:  观察补肾健脾方抑制肿瘤复发转移与血管生成拟态的关系,阐明补肾健脾方抑制肝癌术后复发的初步作用机制。  方法:  裸鼠麻醉固定状态下,在肝脏内原位植入人肝癌高转移模型瘤体(HCCLM3),约1 mm×1 mm×1 mm大小,术后放回无菌环境饲养。术后第15天开腹行新生肿块切除手术,术后无菌饲养。将实验裸鼠分为补肾健脾方组、索拉非尼组、联合用药组、模型对照组,每组6只;新生肿块切除手术后第三天起,根据裸鼠的体重给予相应药物治疗,均采用灌胃给药,共给药28天,每天一次。实验中,记录给药前一天,给药后第7,14,21,28天体重。在给药后第30天,处死全部实验裸鼠并取材,制作瘤体标本,测量瘤体重量和体积。并采用免疫组化检测MMP-2,MMP-9,PI3K,APK,EphA2,VE-cadherin蛋白表达及计算VMD,并观察肝癌远处转移情况。  结果:  ①瘤重和瘤体体积:与模型对照组比较,补肾健脾组、索拉非尼组、联合用药组均能显著减轻复发瘤体重量并缩小体积(P<0.001);联合用药组比补肾健脾组比较更能降低瘤重及其体积(P<0.05)。②鼠重:与模型对照组比较,补肾健脾组裸鼠体重显著增加且差异均有统计学意义(P<0.05);与给药前1天比较,第7、14、21、28天索拉非尼组、联合用药组以及模型组裸鼠体质量均有不同程度的降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。③血管生成拟态:与模型对照组相比较,补肾健脾方能显著抑制肝癌组织中EPHA2,FAK,PI3K蛋白表达(P<0.05)。④肺转移细胞数:与模型组相比,补肾健脾方以及联合用药治疗组显著减少肺转移肿瘤细胞数(P<0.05)。  结论:  补肾健脾方能显著减轻裸鼠移植性肝癌术后复发;减轻瘤重和缩小瘤体体积,具有良好的抑制肿瘤复发的疗效;能够抑制裸鼠移植性肝癌术后肺转移情况,尤其是联合索拉非尼具有良好的抑制肝癌瘤肺转移;能显著改善移植性肝癌术后复发的体重下降情况;能显著抑制肝癌组织中EPHA2,FAK,PI3K蛋白表达,为临床研究补肾健脾方抑制血管生成拟态的作用机制和关键靶点提供了借鉴思路。
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