慢性心力衰竭(chronic heart failure，CHF)是各种器质性心脏疾病终末阶段的一组症候群，其发病率高，是导致死亡的常见原因。CHF的发生及发展与多种病理生理学机制的发生相关，其机制包括：心肌细胞功能障碍、心肌细胞凋亡、心肌重塑、神经-体液因素、细胞炎性因子的激活等。近些年来，虽然药物治疗CHF已经取得巨大的进展，但仍然有相当一部分的患者对药物治疗反应不佳。因此，在进行药物治疗CHF的同时，也在努力寻找非药物治疗的方法。目前，一种全新的称为心脏收缩调节（cardiac contractility modulation，CCM）的非药物治疗CHF方法受到人们高度的关注，这种方法是在心肌的绝对不应期内发放具有一定能量的电刺激（absolute refractory period electrical stimulation，ARPES），该刺激并不起搏心脏，也不增加额外的耗氧量，而能提高心肌的收缩力，从而治疗CHF。目前国内外的离体动物实验和小规模临床研究均显示，ARPES能提高正常心肌以及心力衰竭心肌的收缩力，明显改善CHF患者的心功能，但是CCM的治疗机制尚未完全清楚，且不同强度电刺激对CHF心功能的影响尚待进一步研究。目的：本研究通过采用升主动脉套扎法建立兔慢性心力衰竭动物模型，在X线透视下沿颈总静脉放入心内膜刺激电极至右心室心尖处，对在体心脏给予12小时不同强度绝对不应期电刺激。用无创心脏超声(non-invasive cardiac ultrasonic cardiogram, UCG)检测心功能，双抗体夹心ABC-ELISA法检测血浆脑钠肽（brain natriuretic peptide, BNP），荧光定量PCR（RT-PCR）技术，检测心肌膜连接复合体Junctophilin-2（JPH-2）蛋白基因转录水平。探讨CCM治疗对慢性心力衰竭兔心功能的影响及改善心功能的可能机制，从而为临床治疗提供理论依据。方法：选用24只健康6月龄新西兰大白兔为实验对象，体重在2.5Kg-3.5Kg之间，雌雄不拘，由河北医科大学动物实验中心提供。1制造压力超负荷形成CHF动物模型：所有实验动物开胸后采用人工套扎升主动脉根部形成局部缩窄，造成压力负荷加重，4周后形成CHF模型。所有实验动物手术后第4周末行无创心脏超声检测心功能，所有测量的结果均取连续3次测量的平均值，筛选造模成功的标准为左室射血分数（LVEF）≤40%。2实验动物分组：造模后第4周末行无创心脏超声检测，将符合造模成功标准的18只动物模型随机分为3组，即对照组（n=6），低强度刺激组ARPES-L（n=6），高强度刺激组ARPES-H（n=6）。3实验动物分组及心脏绝对不应期电刺激：(1)对照组：X线透视下经颈静脉放入心内膜刺激电极至右室心尖部，但未行任何强度的电刺激。(2)低强度激组(ARPES-L)：X线透视下经颈静脉放入心内膜刺激电极至右室心尖部，然后给予ARPES即RS刺激，窦性心率情况下，刺激仪通过心内电极感知R波，触发一个S1刺激，RS刺激间期为30ms，脉宽为2ms，刺激电压为舒张阈值的2倍，持续12个小时。(3)高强度刺激组(ARPES-H)：X线透视下经颈静脉放入心内膜刺激电极至右室心尖部，然后给予ARPES，在窦性心率情况下，刺激仪通过心内电极感知R波，触发一个S1刺激，RS刺激间期为30ms，脉宽为2ms，刺激电压为10V，持续12个小时。4分别于造模后第4周末和CCM治疗后即刻行心脏超声测量：舒张末期室间隔厚度（IVSd）、舒张末期左室后壁厚度（LVPWd）、左室收缩末期内径（LVESD)、左室舒张末期内径（LVEDD）、左室射血分数（LVEF）、左室短轴缩短率（LVFS）；所有实验动物随机分组前于耳缘静脉采血5ml，用全自动生化分析仪按常规方法检测电解质（Na+、K+、Cl—、Ca+）、血脂（甘油三酯、极低密度脂蛋白）等一般情况指标；造模后第4周末和CCM治疗后即刻于耳缘静脉采血5ml，采用ABC-ELISA法测定血浆BNP的浓度。5CCM治疗后，打开胸腔，钳夹心脏主动脉、上下腔静脉、肺动、静脉远心端，切断远心端与心脏相连接的血管及周围组织，迅速取出心脏，取下各组右室心尖部刺激部位心肌组织，液氮保存。采用实时荧光定量PCR（RT-PCR）技术检测三组间心肌组织中JPH-2mRNA转录的数量。结果：1实验动物存活情况：采用升主动脉套扎法建立兔慢性心力衰竭模型，术后即刻存活22只，术后第4周末存活20只。根据心脏彩超符合造模成功标准（LVEF≤40%）入选18只。采用透视下经颈静脉放入心内膜刺激电极至右室心尖部给予ARPES，意外死亡2只（低强度刺激组和高强度刺激组各死亡1只，死亡原因为麻醉意外和电极刺破心脏）。2实验动物随机入组前一般情况：各组动物的月龄、体重、性别、电解质（Na+、K+、Cl—、Ca+）、血脂（甘油三酯、极低密度脂蛋白）相比较无统计学差异（P＞0.05）。3心脏超声结果：CCM治疗前，三组各数据相比较无明显统计学差异（P＞0.05）。CCM治疗后，对照组各数据较前稍有下降，但相比较无统计学差异（P＞0.05）；低强度刺激组和高强度刺激组中IVSd、LVPWd与对照组相比无明显统计学差异（P＞0.05），而LVESD、LVEDD、LVEF、LVFS各数据均优于对照组，有统计学差异（P＜0.05）；低强度刺激组与高强度刺激组相比各数据均无显著统计学差异（P＞0.05）。4BNP结果：CCM治疗前，3组BNP水平无明显统计学差异（P＞0.05）。CCM治疗后，对照组BNP水平较前稍有升高，但相比较无统计学差异（P＞0.05）；低强度刺激组和高强度刺激组BNP水平均低于对照组，有统计学差异（P＜0.05），但低强度刺激组与高强度刺激组相比BNP水平无显著统计学差异（P＞0.05）。5JPH-2基因转录测定：CCM治疗后，低强度刺激组和高强度刺激组JPH-2基因表达均高于对照组，有统计学差异（P＜0.05）；低强度刺激组与高强度刺激组相比JPH-2基因表达无显著统计学差异（P＞0.05）。结论：短时间CCM治疗能改善慢性心力衰竭兔的心功能，增强心肌收缩力，对于逆转心室重构效果不明显，但不同强度ARPES对改善CHF动物心功能无显著差异。12小时的ARPES即可使JPH-2mRNA的转录水平表达上调，这可能是ARPES增加心肌收缩力的机制之一。