目的:1.TRPM8作为临床生物标记物,为准确判断胰腺癌的恶性度及预后提供指导。2.TRPM8作为潜在的药物作用靶点,将来可能通过下调TRPM8的表达,来抑制胰腺癌细胞增殖扩撒,从而最终可以发现有效的胰腺癌个性化治疗的新靶点和新思路。方法:1.购买北京龙迈达斯科技开发有限公司胰腺癌组织77例,正常组织30例,用免疫组织化学技术对标本进行实验,并对结果进行统计分析。2.购买正常胰腺细胞株HPCY-5和胰腺癌细胞株Bx PC-3、PANC-1并进行细胞培养,通过QPCR技术测定TRPM8离子通道m RNA的表达情况。3.用Western bot技术检测细胞株HPCY-5、Bx PC-3、PANC-1通道蛋白的表达情况。4.用细胞膜片钳技术检测转染si RNA前后胰腺癌细胞株PANC1细胞膜电流的改变。5.用CCK8试剂盒检测转染si RNA前后胰腺癌细胞株Bx PC-3、PANC-1,分析细胞增殖能力的改变结果:免疫组化实验、Western Blot实验都提示TRPM通道蛋白在胰腺癌细胞中成高表达状态,且免疫组化结果提示肿瘤细胞中TRPM8通道蛋白的高表达与肿瘤的分化程度具有相关性(中低分化vs高分化P<0.05,具有统计学意义)。QPCR检测胰腺癌肿瘤细胞株Bx PC-3、PANC-1中TRPM8 m RNA相对于正常细胞株HPCY-5呈高表达,与免疫组化和Western Blot结果相一致,且P<0.05具有统计学意义。膜片钳技术测定薄荷醇激活的TRPM8离子通道电流明显增大。CCK8法提示TRPM8通道基因敲除的癌细胞株增殖能力出现明显减弱,证明TRPM8通道基因的表达对癌细胞的增殖具有一定影响。