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目的1.栀子有效部位抗缺氧耐疲劳活性成分筛选。2.采用常压密闭实验优选肉苁蓉苯乙醇苷（Cpg）与栀子黄色素（Gyp）抗缺氧活性的最佳混合比例。3.肉苁蓉苯乙醇苷（Cpg）与栀子黄色素（Gyp）优选比例混合物对常氧条件下小鼠运动性疲劳的改善作用。4.肉苁蓉苯乙醇苷（Cpg）与栀子黄色素（Gyp）优选比例混合物对缺氧条件下大鼠运动性疲劳的改善作用。5.肉苁蓉苯乙醇苷（Cpg）与栀子黄色素（Gyp）复方颗粒剂的制备。方法1.富集纯化栀子各部位（栀子水提取物、栀子多糖、栀子环烯醚萜苷以及栀子黄色素）,建立缺氧模型,通过测定小鼠在常压密闭条件下的存活时间筛选栀子抗缺氧活性部位;对栀子各部位进行初步的安全性研究;再建立常压密闭缺氧模型,测定小鼠在常压密闭缺氧条件下的存活时间,计算肺和脑组织含水量,评价活性部位栀子黄色素（Gyp）的抗缺氧作用;在低压低氧动物实验舱中建立小鼠缺氧模型,并通过力竭游泳实验,探讨栀子黄色素（Gyp）对缺氧小鼠运动性疲劳的影响。2.通过常压密闭实验,筛选出肉苁蓉苯乙醇苷（Cpg）与栀子黄色素（Gyp）混合物抗缺氧活性的最优配比。通过测定常压密闭和亚硝酸钠缺氧条件下的小鼠的存活时间以及急性缺氧条件下小鼠的死亡率,对肉苁蓉苯乙醇苷（Cpg）与栀子黄色素（Gyp）优选比例混合物的抗缺氧效果进行评价。3.BALB/C小鼠,50只,雌雄各半。按体重随机分组:空白组（Control,注射用水,0.1 ml/10 g）;阳性组(Positive,Rhodiola,0.50 g·kg-1·d-1);给药低中高剂量组(Cpg与Gyp 1:1混合物;Drug-L,0.10 g·kg-1·d-1;Drug-M,0.30 g·kg-1·d-1;Drug-H,0.50 g·kg-1·d-1)。共5组,10只/组。连续i.g（灌胃）7 d,第7 d给药后,小鼠适应1 h。负重游泳,记录小鼠的游泳力竭时间;生化试剂盒检测小鼠血清或组织中BUN,PA,LD,LDH,GSH,T-SOD,MDH,SDH,Na+-K+-ATPase,Ga2+-Mg2+-ATPase,HG和MG含量;根据Western Blot法测定小鼠肝脏和脑组织中凋亡蛋白Bax,Bcl-2和Caspase-3的表达。4.Wistar大鼠,75只,雄性。按体重随机分组:常氧空白组（NC,注射用水,0.1 ml/10 g）,缺氧空白组（HC,注射用水,0.1 ml/10 g）,力竭游泳空白组（EC,注射用水,0.1 ml/10 g）,力竭游泳阳性组(EP,Rhodiola,0.35 g·kg-1·d-1)以及力竭游泳给药组(ED,Cpg与Gyp 1:1混合物,0.35 g·kg-1·d-1)。共5组,15只/组。将大鼠放于模拟8000 m高原海拔的饲养舱内（NC组大鼠在当地海拔实验室给药和取材）5天,每天在模拟3500 m海拔的实验舱给药,给药后又放回8000 m海拔饲养舱。第5天给药后1 h,在3500 m海实验舱内进行实验操作。对EC组、EP组和ED组大鼠进行负重游泳实验,记录大鼠游泳力竭时间;HE染色法观察大鼠脑、肝脏以及骨骼肌组织的病理学变化;生化法测定大鼠血清或组织中BUN、UA、CRE、CK、PA、MDA、NOS、NO、CAT、GSH-PX、T-SOD、LD、LDH、ATP、HG以及MG含量;根据Western Blot法相关操作,对大鼠肝脏和脑组织中Bax,Bcl-2,Nox2和Ampk蛋白表达进行测定。5.选用淀粉、糊精以及乳糖作为辅料,75%乙醇为粘合剂,分别制备颗粒剂。根据药典中对于颗粒剂相关指标的规定,对辅料以及辅料比例进行筛选;并对最终制备的颗粒剂进行质量评价。结果1.栀子黄色素（Gyp）能延长小鼠常压密闭抗缺氧时间,并且栀子黄色素安全性良好;与模型（Model）组相比,栀子黄色素高剂量(Gyp-H,1.00 g·kg-1·d-1)能够显著延长小鼠常压密闭缺氧下的存活时间（P<0.05）;与Model组相比,栀子黄色素（Gyp）各剂量均能减轻小鼠脑组织和肺组织含水量（P<0.05）,且Gyp-H组的效果最显著（P<0.01）;力竭游泳实验结果显示,栀子黄色素（Gyp）能延长小鼠在缺氧条件下的游泳力竭时间,与Model组相比,栀子黄色素中高剂量（Gyp-M和Gyp-H）能显著延长小鼠游泳力竭时间（P<0.05或P<0.01）。2.肉苁蓉苯乙醇苷（Cpg）与栀子黄色素（Gyp）混合物具有较好的抗缺氧活性,其中Cpg与Gyp以1:1混合时的抗缺氧活性显著;并且与Control组相比,Cpg与Gyp的1:1混合物能显著增加小鼠在缺氧条件下的存活时间,降低死亡率（P<0.05）。3.游泳实验结果显示,与Control组相比,肉苁蓉苯乙醇苷（Cpg）与栀子黄色素（Gyp）优选比例混合物各剂量均能有效延长小鼠游泳力竭时间,其中低剂量和高剂量（Drug-L和Drug-H）组小鼠游泳力竭时间延长最显著（P<0.05）;相关指标测定结果显示,相比于Control组,肉苁蓉苯乙醇苷（Cpg）与栀子黄色素（Gyp）优选比例混合物可以降低BUN的含量,升高血清或组织中PA及GSH的含量,增强T-SOD、LD、LDH、SDH、MDH、Na+-K+-ATPase以及Ga2+-Mg2+-ATPase的活性,增加HG和MG含量;Western Blot结果显示,相比于Control组,Cpg与Gyp 1:1混合物给药组小鼠肝脏和脑组织中蛋白Caspase-3的表达水平明显降低（P<0.05）,蛋白Bax与Bcl-2的比值明显下降（P<0.05）。4.与力竭游泳空白组（EC）相比,力竭游泳给药组（ED）大鼠游泳力竭时间显著延长（P<0.05）;组织病理学结果显示,Cpg与Gyp优选比例（1:1）混合物能够减少大鼠肝脏、脑及骨骼肌组织中的炎性细胞浸润,改善大鼠的组织病理学变化;指标测定结果显示,Cpg与Gyp优选比例（1:1）混合物能够降低缺氧力竭游泳大鼠血清中BUN,UA以及CRE含量,降低大鼠血清或组织中PA,CK,MDA,NOS和NO含量,增加CAT,GSH-PX,T-SOD,LD,LDH,ATP,HG和MG含量;WB结果显示,Cpg与Gyp优选比例（1:1）混合物能够降低缺氧游泳大鼠肝脏和脑组织中蛋白Nox2以及Ampk的表达水平,能降低Bax与Bcl-2的比值。5.以乳糖与药物比为2:1制备的颗粒剂,具有较好的成型性和稳定性,粒度损失率、溶化性、含水量及干燥失重符合药典中的相关质量评价标准。结论1.栀子黄色素（Gyp）是栀子抗缺氧的活性部位,安全性良好,并且对缺氧运动性疲劳的改善效果显著。2.肉苁蓉苯乙醇苷（Cpg）与栀子黄色素（Gyp）混合物抗缺氧活性显著。其中优选比例（1:1）能够显著延长小鼠在缺氧条件下的存活时间,降低缺氧死亡率。3.肉苁蓉苯乙醇苷（Cpg）与栀子黄色素（Gyp）优选比例混合物能够延长常氧条件下小鼠的游泳力竭时间,对小鼠的运动性疲劳具有一定的缓解作用。4.肉苁蓉苯乙醇苷（Cpg）与栀子黄色素（Gyp）优选比例混合物能够延长模拟高原缺氧条件下大鼠的游泳力竭时间;Cpg与Gyp优选比例（1:1）混合物能够加快清除体内堆积的不良代谢产物,增加能源物质的储备,增强机体对自由基的清除能力,增强相关代谢酶的活性;Cpg与Gyp优选比例（1:1）混合物也能降低凋亡蛋白的表达,抑制炎性细胞的浸润。综上,Cpg与Gyp优选比例（1:1）混合物对缺氧条件下运动性疲劳的改善作用显著。5.以乳糖:药物为2:1时,制备的肉苁蓉苯乙醇苷和栀子黄色素得复方颗粒质量稳定,各项质量评价标准符合药典中的相关要求,可用于扩大生产。