牡丹花对肾素和ACE抑制作用的研究

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肾素-血管紧张素-醛固酮系统是调节血压的重要系统,肾素和血管紧张素转换酶(ACE)是系统中2个重要的水解酶类,食源性的具有肾素和ACE双重抑制作用的抑制剂一直是研究的热点,非肽类食源性肾素和ACE抑制剂更是引起研究者的关注。本研究基于前期研究基础,对市售的不同品种、不同花色和不同花期的牡丹花的肾素和ACE抑制活性进行评价,并考察其抗氧化活性、总酚和总黄酮含量;进一步分离纯化紫色牡丹花(乌龙捧盛)中抑制肾素和ACE的主要活性物质。为探讨新型血压调控因子提供新思路,并为进一步健全食用牡丹花的功能价值体系、实现其高值化利用及促进相关食用花卉食品产业的发展提供更丰富的基础理论依据。结果表明,市售的牡丹和芍药花茶样品中,红色系的牡丹和芍药花茶水提物具有优良的肾素和ACE抑制活性,而白色系的牡丹花水提物抑制肾素和ACE活性的能力很弱。其中活性最高的样品(水提物抑制肾素的IC50值为0.08 mg/mL,抑制ACE的IC50值为0.23 mg/mL;相关性分析表明,不同样品水提物的肾素和ACE抑制活性及DPPH、ABTS自由基清除能力和铁离子还原能力与样品中总酚含量显著正相关(p<0.01),相关系数分别为0.99、0.91、0.99、0.99和0.98。7个不同花色的牡丹花样品水提物对肾素和ACE均有一定程度的抑制作用,但是活性差异显著,强弱顺序为:乌金耀辉>赵紫>豆绿>红太阳>姚黄>赵粉>丹凤白,抑制活性差异显著。在浓度为0.27 mg/mL的条件下,对肾素的抑制率范围在19.20-64.00%之间,在浓度为0.59 mg/mL的条件下,对ACE的抑制率范围为25.70-89.50%之间。红色牡丹花(红太阳)的四个花期:花苞紧实期、花苞松散期、半开期、盛开期的样品水提物对肾素和ACE的抑制率呈下降的趋势,在浓度为0.27 mg/mL的条件下,对肾素的抑制率从62.50%降到46.70%,在浓度为0.59 mg/mL的条件下,对ACE的抑制率从74.30%降到56.50%。抗氧化能力与总酚和总黄酮含量也呈下降的趋势。通过醇沉除糖、AB-8大孔吸附树脂层析和超滤,紫色牡丹花(乌龙捧盛)提取物在浓度为0.11 mg/mL的条件下对肾素的抑制率从40.00%提升到了89.74%,在浓度为0.24 mg/mL的条件下对ACE的抑制率从54.31%提高到95.59%,采用高效液相色谱法对活性最高的>3 kDa组分中的活性成分进一步分离富集,得到了5个纯度在95%以上的活性峰,对抑制肾素和ACE活性较好的组分P1、P2、P3通过液质联用得到P1的分子量为187.09 m/z、P2的分子量为293.17 m/z、P3的分子量为609.15 m/z,P1抑制肾素和ACE的IC50值分别为445.93和601.69μM,P2抑制肾素和ACE的IC50值分别为147.48和233.48μM,P3抑制肾素和ACE的IC50值分别为162.18和247.34μM。为后续研究奠定重要基础。
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