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弯曲菌,尤其是空肠弯曲菌(C.jejuni)和结肠弯曲菌(C.coli),能通过食物链进入人体,引起人类弯曲菌病,是重要的食源性病原菌之一。禽类是弯曲菌的天然宿主,禽肉及肉制品是感染人的重要来源。在活禽市场中人们与生禽肉接触更加频繁,更易感染弯曲菌。近年来随着国内畜牧业长期广泛的使用抗生素,耐药弯曲菌日益增加,它一旦传给人类,给人类健康带来潜在的巨大威胁,所以对活禽市场弯曲菌的流行性进行调查及对其耐药机制进行研究,在人类的公共卫生方面有非常重要的意义。本研究从上海市4个区的5个活禽市场收集364份禽类盲肠内容物样本,经过弯曲菌分离、双重PCR鉴定和API生化鉴定得到209株弯曲菌,总分离率为57.42%。采用微量琼脂稀释法测定84株C.jejuni和125株C.coli对6类13种常用抗生素的最小抑菌浓度(MIC),结果表明,对于喹诺酮类和四环素类抗生素,C.jejuni和C.coli的耐药率都很高,均超过96%;对于大环内酯类抗生素,C.jejuni的耐药率低于6%,而C.coli的耐药率高于80%；对于克林霉素和氨基糖苷类抗生素,C.jejuni的耐药率分别为16.67%和低于28%,而C.coli的耐药率分别为84.8%和高于92%;对于氯霉素和氟苯尼考,C.jejuni的耐药率分别为66.67%和51.19%,C.coli的耐药率分别为76%和1.6%。75%的C.jejuni和98.4%的C.coli呈多重耐药,耐药谱型复杂,多达21种。用PCR方法在202株四环素类耐药弯曲菌中均检测到tet(O)基因；在158株氯霉素耐药弯曲菌中检测到81株含有cat基因,未检测到cmlA基因；在75株氟苯尼考耐药弯曲菌中未检测到floR基因和cfr基因。采用错配PCR方法(MAMA PCR)在所有喹诺酮类耐药弯曲菌中均检测gyrA基因QRDR区C-257-T突变。在103株大环内酯类耐药弯曲菌中检测23S rRNA基因A2075G和A2074C突变,发现除了25株其余都含A2075G突变,且都是高水平耐药(MIC>128μg/mL),未检测到A2074C突变。用PCR方法在25株大环内酯类耐药弯曲菌中未检测到编码L4和L22蛋白的基因发生突变,但在21株中检测到弯曲菌中罕见的ermB基因。采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)对160株弯曲菌进行分子分型,结果发现细菌来源和PFGE谱型间没有比较密切的关系,耐药谱型与PGFE谱型间有一定的联系,但是不强。含cat基因和ermB基因的C.coli的PFGE谱型间的亲源关系较密切,且每一谱型弯曲菌的来源不同。综上所述,上海市活禽市场禽源弯曲菌对不同临床常用抗生素的耐药性存在很大差异,多重耐药情况严重。对不同抗生素的耐药机制进行研究,在大环内酯类耐药弯曲菌中发现了罕见的ermB基因。PFGE分型结果表明上海市活禽市场中存在多种不同谱型的弯曲菌。本研究为食品动物源尤其是禽源耐药弯曲菌的风险评估与防控提供了实验依据。