红景天对博莱霉素诱导的大鼠肺损伤干预作用实验研究

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目的:根据红景天中医药理特性和现代医学研究结果,以及SARS期间对急性肺损伤的临床治疗情况,本课题采用博莱霉素(BLM)经支气管灌肺诱导大鼠肺损伤模型,观察肺损伤第3、 7、 28天各个时期的功能状态、病理特点和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、粒单细胞-集落刺激因子(GM-CSF)、巨噬细胞趋化蛋白-1(MCP-1) 变化规律,研究中药红景天对肺损伤不同时期炎症和纤维化过程的干预作用和可能机理。方法:将大鼠分为正常对照组、BLM组、BLM+红景天组和BLM+甲强龙组,实验组用BLM 5mg/kg经支气管灌肺造成大鼠肺损伤;运用计算机体层摄影(CT)、血气分析等临床方法观察大鼠肺组织影像和功能状态;用肺系数和肺通透指数显示肺炎性水肿和渗出情况;用HE染色、VG染色和电子显微镜研究各个时期大鼠的病理特点;用免疫组织化学观察GM-CSF、α-SMA肺组织中的表达;用酶联免疫吸附实验检测大鼠血浆TNF-α、GM-CSF、MCP-1含量;用氯胺T法测定第28天肺组织胶原蛋白含量。结果:CT检查显示BLM损伤第3天双肺出现模糊云雾状阴影,严重者呈大片状阴影,边界不清,以肺门为中心放散走行,逐步变淡,第28天肺门旁血管、支气管周围和小叶间隔出现结节状或蜂窝状改变和网状致密影,部分条索状高密度影沿支气管走行,自肺门向肺中、上肺野放射,肺间质扭曲变形,伴肺部和支气管过度充气征;红景天治疗组影像改变第3天明显轻于模型组,第28天改变大致与模型组相似,但密度稍轻于模型组。各组肺指数和通透指数在BLM损伤各期普遍增高,以第3和第7天为重,红景天治疗组有所降低,氧分压也明显高于模型组。病理和电子显微镜检查提示BLM损伤后第3天和第7天肺组织以急性肺泡炎和间质性肺炎为主,表现为弥漫性炎性细胞浸润,肺广泛出血和急性水肿;电镜下可见Ⅰ型细胞变性、崩解和脱落;Ⅱ型细胞增生、肿胀,肺泡内板层小体明显增多,血管内皮细胞肿胀,红景天组病理改变明显轻于模型组。第28天以肺间质改变为主,气管壁增厚,平滑肌明显增生,淋巴细胞呈节结状改变,肺泡隔增厚增宽,成纤维细胞增多;电镜下可见纤维细胞增生,胶原纤维明显增多,血管内 中文摘要皮系统和肺泡上皮系统结构紊乱,红景天组病理改变与模型组接近。 免疫组化显示正常肺组织中肺泡巨噬细胞不表达或微弱表达GM一csF,BLM损伤后表达增强,红景天与甲强龙组治疗后第7天GM一CSF阳性反应比模型组减低,第28天三组之间无显著差异,Q一SMA从BLM损伤第7天后表达增强,第28天最强,红景天对a一SMA无明显抑制效果。ELISA结果显示,BLM肺损伤第3和第7天各组血清TNF一a、MCP一1、GM一CSF浓度明显升高,红景天治疗组血浆TNF一a、MCP一1、GM一CS低于模型组,在第28天三组血浆TNF一Q、MCP一1、GM一CSF的含量无显著差别。肺损伤第28天肺胶原蛋白含量测定,模型、甲强龙和红景天三组胶原含量均升高,无显著差别。结论:1.BLM引起的大鼠肺损伤是炎性反应和纤维增生共同组成的病理发展过程,早期损伤以炎性渗出和出血为主,与SARS目前临床报道的病理改变相似;后期以慢性炎症和纤维组织增生为主。 2.肺损伤早期,红景天可能通过干扰TNF一a、MCP一、GM一CSF的合成抑制炎症反应引起的急性肺组织水肿和出血。在肺损伤各个时期,红景天对血管内皮细胞及毛细血管有明显的保护和扩张作用,有效改善肺组织微循环。 3.在本实验中,红景天对肺损伤过程中纤维细胞增生、胶原合成抑制作用不明显,待于将来进一步研究证实。
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