分子生物学诊断新方法在淋巴结结核诊断中的应用研究

来源 :北京市结核病胸部肿瘤研究所 | 被引量 : 3次 | 上传用户:xpzcz1995
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目的:浅表淋巴结结核目前常用影像学、细菌学培养、常规病理学做为主要的诊断手段,但这些方法在敏感性和特异性方面均不理想。近年来检测结核分枝杆菌特异基因的分子生物学检测方法发展迅速,具有快速、准确等优点。因此本研究通过前瞻性研究,评估了Xpert MTB/RIF新技术、荧光定量PCR技术及高分辨熔解曲线法在浅表淋巴结结核诊断中的应用,并与目前常用的诊断方法进行了对比研究。方法:从2015年3月到2016年1月采用针吸活检和切除活检两种方法连续的收集了86例疑似淋巴结结核标本和13例其他淋巴结疾病标本。收集的标本平均分为两部分,一部分用于Xpert MTB/RIF的检测、BACTEC MGIT960培养和罗氏培养,另一部分用于常规病理学检查、石蜡包埋标本的PCR检测、荧光PCR熔解曲线利福平和异烟肼的耐药检测。结果:临床疑似淋巴结结核的患者81例,Xpert MTB/RIF检测MTBC阳性74例(91.4%),组织标本PCR阳性60例(74%),BACTEC MGIT960培养阳性24例(29.6%),罗培阳性13例(16%),病理形态学诊断淋巴结结核38例(46.9%),所有方法的特异性为100%。分子生物学检测技术敏感性显著高于传统诊断方法,其中XperMTB/RIF是敏感性最高的诊断方法。利福平耐药检测方面,Xpert MTB/RIF检出3例rpoB基因突变病例(3.7%),结核分枝杆菌药敏实验检测到利福平耐药2例(2.4%)这两例与Xpert检测结果符合。异烟肼耐药方面,熔解曲线检测异烟肼耐药突变型7例(8.1%),其中1例有药敏结果。分子生物学技术在耐药检测中显示出更高的灵敏性,且符合率较好,XperMTB/RIF在利福平耐药检测中最为敏感,但无法检测检测异烟肼耐药性,熔解曲线法检出率较低,但同时可以检测利福平和异烟肼的耐药性。结论:分子检测有助于提高淋巴结结核诊断敏感性。分子检测在耐药淋巴结结核诊断中发挥着重要作用,提高了利福平、异烟肼的耐药检测的敏感性。分子生物学、病理学、细菌学联合的诊断新模式可以提高该疾病诊断的敏感性。淋巴结结核患者中,耐药的发生低于肺结核,利福平的耐药与异烟肼的耐药并不是同时发生的,异烟肼耐药多于利福平耐药。
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