【摘 要】
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目前富马酸的生产方法主要依靠以石油为底物的化学法,生物法发酵生产富马酸可以克服原料不可再生的不足,更加的绿色环保。通过培养基浓度与粘度的不同,可使种子培养成大小均匀的小球状菌丝体,通过200rmp、30℃的发酵培养132h,最高富马酸浓度可达33.8 g/L。通过使用少根根霉网布固定化和丝瓜瓤固定化的方式进行发酵,相比游离化的小球状发酵,发酵周期缩短36.36%,产量也有提高;本实验通过以葡萄糖为
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目前富马酸的生产方法主要依靠以石油为底物的化学法,生物法发酵生产富马酸可以克服原料不可再生的不足,更加的绿色环保。通过培养基浓度与粘度的不同,可使种子培养成大小均匀的小球状菌丝体,通过200rmp、30℃的发酵培养132h,最高富马酸浓度可达33.8 g/L。通过使用少根根霉网布固定化和丝瓜瓤固定化的方式进行发酵,相比游离化的小球状发酵,发酵周期缩短36.36%,产量也有提高;本实验通过以葡萄糖为底物生产富马酸,优化了最佳的底物浓度,在5升发酵罐中(装液量为3升)通过30℃、2vvm的通气量、400 rmp的搅拌转速、一水合葡萄糖为100 g/L时发酵,可以得到31.42%的转化率。通过使用COPASI软件进行建模拟合,经过五组数据的拟合后平均R2值大于0.9,说明拟合效果良好。发现了影响生产富马酸的关键物质丙酮酸和草酰乙酸,以及6步关键的代谢反应。通过对氮源的分析,探讨了6种实验室常见有机氮源的对发酵的影响,结果表明酪蛋白胨可以获得更高的富马酸时空产率;蛋白胨可以获得更高的转化率,酵母浸粉因所含营养物质丰富全面而可获得更高的生物量。与此同时对发酵的工艺进行了调节,改善后的一步培养发和分步培养法相比,可以得到相似的产量,并可节约23.07%的碳源、49.75%的氮源与近100%的水用量。并对一步培养法中的氮源进行了种类和添加量上的对比。研究表明:以蛋白胨为氮源的一步培养法最适发酵浓度为2 g/L,可以得到45.84 g/L的富马酸产量。产量比优化后的游离状态发酵富马酸产量进一步提高了 35.62%。因富马酸的溶解度受到温度与pH的影响较大,因此利用其性质通过冷却结晶的一级分离与活性炭吸附的二级分离可以得到80.33%的富马酸的提取率,最终富马酸的纯度可大于95%。
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