【摘 要】
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该论文的工作意在克隆小鼠次级淋巴样组织趋化因子（SLC）基因,并构建其真核表达载体pcDNA3.1（+）-mSLC,继而研究这一真核表达载体在体内外的表达,以及表达产物的免疫趋化功能.为此,
【出 处】
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中国协和医科大学 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部
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该论文的工作意在克隆小鼠次级淋巴样组织趋化因子（SLC）基因,并构建其真核表达载体pcDNA3.1（+）-mSLC,继而研究这一真核表达载体在体内外的表达,以及表达产物的免疫趋化功能.为此,首先用RT-PCR的方法从C57BL/6小鼠胸腺组织克隆出SLC基因,并通过测序证明这一基因即为小鼠SLC基因Scya21b型;继而构建真核表达载体pcDNA3.1（+）-mSLC.In vitro,利用基因枪、脂质体、电穿孔的方法,将pcDNA3.1（+）-mSLC分别转染至小鼠黑色素瘤细胞系B16F10、B16P15和小鼠红白血病细胞系FBL-3,通过趋化小室趋化实验检测表明,转染SLC基因的肿瘤细胞培养上清具有针对淋巴细胞的趋化功能.In vivo,利用基因枪的手段,对小鼠皮肤局部转染SLC基因.通过皮肤病理检查发现,与转染空载体相比,基因枪轰击局部皮内有明显的淋巴细胞浸润.说明基因枪介导的SLC基因在体内能够表达,并具有趋化活性.用G<,418>对转染SLC基因的B16P15、FBL-3细胞进行持续筛选,得到成功转染pcDNA3.1（+）-mSLC的肿瘤细胞,用于进一步研究SLC基因修饰的肿瘤细胞生物学行为的改变.
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