论文部分内容阅读
纳米药物递送系统(Nano Drug Delivery System,NDDS)是纳米技术在医学领域的应用,广泛用于疾病的诊断和治疗。动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)作为一种慢性心血管疾病,是导致全球人口死亡的主要原因之一。利用NDDS治疗慢性疾病显示出较好的应用前景。雷帕霉素(rapamycin,RAPA)具有抗AS作用,但因其水溶性差,限制了它的临床使用。聚合物纳米颗粒作为NDDS中的一大类,具有改善药物疏水性及通过EPR效应实现靶向递送的作用。本论文中构建两种NDDS用于RAPA的递送。一种是使用具有两亲性的聚乙二醇-聚乳酸聚乙醇酸共聚物(PEG-PLGA)作为药物的载体,通过溶剂置换法制备,获得PEG-PLGA载药纳米颗粒的粒径在120 nm左右,包封率为81%,载药量为3.7%。体外实验表明RAPA以一种缓慢的方式释放,持续6天后的累积释放量约65%。相对于游离RAPA,该载药纳米颗粒对Raw 264.7和Jurkat T细胞增殖具有显著的抑制作用,对HFF-1细胞表现轻微的抑制作用。BALB/c小鼠体内的药效代谢动力学实验证实PEG-PLGA载药纳米颗粒能缓释RAPA,较游离RAPA具有更高的生物利用度。在该研究中,通过简单的方法成功地制备了PEG-PLGA载药纳米颗粒,并且显示出比游离RAPA更好的药理学效果。然而,通过EPR效应实现的被动靶向可能限制PEG-PLGA载药纳米颗粒的有效靶向递送。因此,有必要设计具有主动靶向功能的新型载体以实现更好的治疗效果。另一种NDDS是基于高分子量的透明质酸(hyaluronic acid,HA),它是与AS相关的细胞表面受体的活性配体。HA主要通过己二酸二酰肼(ADH)修饰以制备HA-ADH衍生物,后者可与视黄醛(ATR)反应获得具有pH敏感性腙键及自组装能力的HA-ATR聚合物,使用超声和透析结合的方法可以包载RAPA。通过优化HA-ATR制备过程中的实验条件,获得的载药纳米颗粒在粒度、形态、药物释放和细胞作用方面进行表征。HAATR载药纳米颗粒的粒径约450 nm,呈现均一球型,包封率为40%,载药量为12%。在不同pH条件下进行的体外释放研究证明了HA-ATR载药纳米颗粒的pH敏感性,表现在pH 5.5时的RAPA累积释放率较pH在6.5及7.4时更高。为了减小纳米颗粒的粒径,使用维生素E聚乙二醇琥珀酸酯(D-α-Tocopherol polyethylene glycol succinate,TPGS)来增强RAPA、ATR和维生素E之间的疏水相互作用,从而形成更紧密的内部核心。经优化后,HA-ATR-TPGS颗粒的粒径减小到300 nm,包封率和载药量分别提高到59%和17%。HA-ATR-TPGS载药纳米颗粒的球型外观通过TEM和AFM观察。CCK-8细胞实验表明HA-ATR及HA-ATR-TPGS载药纳米颗粒均对Raw 264.7细胞的增殖具有显著的抑制作用,对HFF-1细胞有轻微的抑制作用。本研究制备的两种NDDS都可以实现RAPA的有效包载,为进一步的细胞和动物实验以及AS的临床治疗奠定基础。