恒定自然杀伤性T细胞(invariant nature ki1ler T,iNKT)在肿瘤过继性免疫治疗中发挥重要作用,其治疗效果与细胞数量和杀伤能力直接相关。为研究稳定表达 CD8α-IL21、CD14、CD19、CD86、CD163 和 CD137L 的 K562 工程细胞(简称滋养细胞)对iNKT细胞数量的扩增和杀伤能力的影响,采集健康志愿者外周血单核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC),用滋养细胞联合传统使用的白介素2(IL-2)、α-半乳糖神经酰胺共同培养,未加入滋养细胞的扩增方案作为对照组。以细胞计数法和流式细胞分析法分别比较iNKT细胞的扩增效果和细胞表面受体表达水平;并采用CFSE/7-AAD法检测扩增后iNKT细胞对K562、PC3、A549、HepG2肿瘤细胞的杀伤能力;构建荷PC3Fluc细胞肿瘤小鼠模型并进行过继性iNKT细胞免疫治疗,通过IVIS生物发光摄像系统观察治疗效果。经过两周的培养扩增,经滋养细胞扩增激活的iNKT细胞比对照组数量提高22倍;扩增后PBMC中的iNKT细胞的纯度从1%提高到98.5%;杀伤实验结果显示,扩增的iNKT细胞对K562、PC3、A549、HepG2肿瘤细胞的杀伤作用显著增强;动物实验结果显示,经滋养细胞扩增的iNKT细胞显著提高了对肿瘤模型小鼠的治愈率和存活率。本研究扩增激活的iNKT细胞数量足,纯度高,杀伤功能强,足以满足临床治疗的需要。