【摘 要】
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α-甘露糖苷酶(α-mannosidase, α-man)是植物细胞壁糖蛋白代谢过程中的关键性糖苷酶,在植物果实发育成熟过程中起着重要的作用。本研究以呼吸跃变型甜瓜品种河套蜜瓜为研究
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α-甘露糖苷酶(α-mannosidase, α-man)是植物细胞壁糖蛋白代谢过程中的关键性糖苷酶,在植物果实发育成熟过程中起着重要的作用。本研究以呼吸跃变型甜瓜品种河套蜜瓜为研究对象,利用RT-PCR技术从甜瓜果实中克隆得到甜瓜α-甘露糖苷酶基因cDNA片段,并构建了RNAi表达载体pART27-α-man,通过花粉管通道法转化甜瓜,获得了大量T0转化种子。从每份T0转化种子中随机选取12粒种子,播种于育苗盘内,进行PCR检测,选取阳性率高的T0转化种子,播种于大田,经果实耐贮藏表型筛选,获得了耐贮性强的T。代转pART27-α-man果实24个,采集T1转化种子。从每个株系中随机选取12粒T1种子,播种于育苗盘,进行PCR检测,获得PCR检测阳性株系10个。选取2个株系,将T,种子种植于日光温室,获得T,果实及T2种子。结果表明转α-man RNAi载体的甜瓜果实耐贮藏性和货架期明显延长,初步表明α-man基因在甜瓜果实成熟衰老过程中发挥重要作用。
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