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研究目的：流行病学研究提示microRNA-155在外周血的表达水平与T细胞对于oxLDL的抗原反应性存在正性相关，且两者随着患者年龄的增大都逐渐降低。本研究旨在阐明microRNA-155抑制序列能够影响CD4+T细胞的增殖和分化，进而减轻共培养体系中内皮细胞炎症反应和平滑肌细胞增殖。研究方法：分离脐血中的造血干细胞和幼稚CD4+T细胞。使用SCF、GM-CSF和TNF-α诱导造血干细胞分化为幼稚DC，随后加入oxLDL使之转化为oxLDL特异性的成熟DC。同时利用IL-2、IL-4、IL-7使CD4+T细胞保持增殖状态，并分别使用包含有microRNA-155抑制序列的慢病毒颗粒和空载慢病毒颗粒（MOI=10）转染之。将成熟DC辐照灭活后以1:10的比例与野生组、抑制病毒转染组、空白病毒转染组幼稚CD4+T细胞共培养，使各组CD4+T细胞对于oxLDL产生特异性免疫。使用oxLDL持续刺激各组CD4+T细胞3d，之后利用CFSE检测T细胞的增殖，利用流式细胞仪各组T细胞亚群的比例，利用realtime-PCR检测IL-2、IL-4、IL-10、TNF-α、TGF-β、HB-EGF和bFGF等的mRNA表达，并评价各组T细胞对于炎症反应内皮细胞的粘附性。以transwell小室为基础构建体外血管壁模型。将与脐血来源于同一供体的脐静脉内皮和脐动脉平滑肌分别接种于PET膜的两个侧面并培育7d，使两种细胞之间通过微孔形成缝隙连接。将各组oxLDL特异性CD4+T细胞以10:1的比例与内皮细胞和平滑肌细胞共培养3d，利用流式细胞仪检测内皮细胞CD80、CD86、VCAM和HLA-DR的表达量，利用JC-1检测反映内皮细胞早期凋亡的线粒体膜电位，并利用EMSA检测内皮细胞NK-κB通路的激活情况。在平滑肌细胞方面则进行划痕试验、细胞周期检测和EdU渗入实验，并使用realtime-PCR检测CNN、TAGLN和ACTA的mRNA表达量，利用EMSA检测Wnt通路的激活情况。采用SPSS16.0软件对所得数据进行统计学分析，使用不完全匹配的、双尾的、学生t检验，P <0.05，差异有统计学意义。研究结果：在oxLDL刺激3d后，转染microRNA-155抑制序列的CD4+T细胞中Th2和Treg细胞的百分比明显高于野生组和空白病毒转染组（P<0.05)，IL-2、TNF-α、HB-EGF和bFGF的mRNA表达量明显低于野生组和空白病毒转染组（P<0.05)，而IL-4、IL-10和TGF-β明显高于其余两组（P<0.05)。同时转染microRNA-155抑制序列会明显抑制CD4+T细胞的增殖（P<0.05)，同时对于细胞粘附产生影响（P<0.05)。将各组CD4+T细胞与以transwell小室基础的体外血管壁模型共培养，转染抑制序列的CD4+T细胞可以明显减轻内皮细胞表面CD80、CD86、VCAM和HLA-DR的表达量（P<0.05)和细胞凋亡（P<0.01)，同时NF-κB通路的激活程度也相应减低。平滑肌细胞划痕实验等显示转染microRNA-155抑制序列的CD4+T细胞能够减轻细胞增殖，同时在12h时减轻CNN、TAGLN和ACTA的mRNA表达量（P<0.02)，并降低Wnt通路的激活程度。研究结论：减少CD4+T细胞中microRNA-155的表达会抑制T细胞的激活和增殖，并使之向Th2和Treg方向分化，进而改变细胞因子分泌谱。CD4+T细胞的这种改变会减轻内皮细胞的炎症反应和平滑肌的增殖