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黄连上清丸是由黄连、黄芩、黄柏、大黄等十七种药材制成的中药复方制剂,收录于《国家基本中成药》及2010版中华人民共和国药典,具有清热、止痛等作用,至今已沿用近500年。但其体内药动学行为及作用物质基础仍不明确,且未见关于黄连上清丸药代动力学及血清药物化学研究的任何报道。本论文同时对黄连上清丸中芦荟大黄素和大黄酸进行了含量测定,用以评价市场上黄连上清丸的质量,并首次对其进行了大鼠体内的药代动力学及血清药物化学研究,有助于阐明作用机制,明确药效物质基础。1、建立了一种新的HPLC法同时测定黄连上清丸中芦荟大黄素及大黄酸的含量,并将其应用于不同厂家不同批次的产品。色谱柱为Inertsil®ODS-3(4.6mm×150mm,5μm),流动相为甲醇-0.2%磷酸(65:35),流速1.0ml/min,检测波长254nm,柱温25℃,进样量10μl。此条件下,芦荟大黄素、大黄酸在8.14-41.40μg/ml(r=0.9999)、6.49-29.70μg/ml(r=0.9998)浓度范围内线性关系良好。且方法专属性、重复性、仪器精密度、加样回收率、稳定性均符合测定要求。结果显示部分不同厂家及同一厂家不同批号间黄连上清丸中芦荟大黄素和大黄酸的含量有明显上下浮动趋势。2、首次建立了HPLC-DAD法测定黄连上清丸中大黄酸在大鼠血浆中的浓度,并研究其药动学过程。色谱柱为Inertsil®ODS-3(150mm×4.6mm,5um),流动相为甲醇-0.2%磷酸(80:20)。内标为1,8-二羟基蒽醌。检测波长254nm,流速1.0ml/min,柱温25℃,进样量10μl。结果表明,在0.05-5μg/ml血药浓度范围内,大黄酸呈良好的线性关系(r=0.9981)。高、中、低浓度下,日内精密度均小于11.9%,日间精密度均小于14.7%;提取回收率为86.5%-106.3%。一定浓度下,内标提取回收率为91.2%。RSD均小于15%。药动学结果显示,一定剂量下,黄连上清丸中大黄酸在体内呈二室开放模型,达峰时间为0.222h,达峰浓度为0.219μg/ml。3、首次利用LC-Q-TOF/MS技术对黄连上清丸进行血清药物化学研究。体外检测到黄连上清丸中46个化学成分,鉴定了其中27个,比较给药前后大鼠血清MS及MS/MS图,及其与体外化学成分的差异。寻找到来源于黄连上清丸的原型成分15个,鉴定了其中10个,发现代谢产物21个,鉴定了其中8个。结果显示黄连上清丸主要有效成分小檗碱、大黄酸、黄芩苷、大黄素等均以原型入血,部分地揭示了黄连上清丸的药效物质基础。