乳脂虽然为新生动物提供大量的热能和必需脂肪酸,但高浓度的C14:0(豆蔻酸)和C16:0(棕榈酸)促进血浆中低密度脂蛋白胆固醇浓度的提高,从而诱发心脑血管疾病,对健康产生潜在的危害。因此合理改善乳脂肪构成、提高乳品质一直是奶业生产中受到重点关注的问题。为此本试验旨在利用乳汁体细胞研究不同泌乳期乳腺脂肪合成相关基因的表达,为阐明影响乳脂合成因素及其内在分子机理提供理论依据,为反刍动物原料乳的优化,特别是乳脂肪的营养调控和遗传改良提供理论依据。主要结果如下:乳汁体细胞的制备:以奶牛初乳、常乳和末乳为研究对象,用直接镜检法和血球计数板法及台盼蓝拒染法对SCC进行鉴定,参照Puissant法提取乳汁体细胞中的RNA,通过电泳和紫外分光光度计对RNA的纯度、完整性和含量进行检测,RT-PCR法对看家基因GAPDH进行检测。结果表明:SCC约在10～18.3万/ml之间,证明是从健康状态下采取的乳汁体细胞。活力约为60～67.5%之间,提取RNA的OD260/OD280值在1.65～2.0之间,含量为0.6～1.0mg/ml之间,在452bp处有看家基因GAPDH的目的条带。表明成功地制备了乳汁体细胞。乳腺脂肪合成相关基因的表达:以奶牛初乳、常乳和末乳中的乳汁体细胞为研究对象,看家基因GAPDH为内参,对乳汁中LPL、CD36、VLDLR、ACSS2、ACSL1、FABP3、SCD、ACC、FASN、ADFP、XDH和BTN1A1 mRNA进行半定量RT-PCR分析。结果表明,LPL、CD36、VLDLR、ACSS2、ACSL1、FABP3、SCD、ADFP、XDH和BTN1A1 mRNA在初乳、常乳和末乳中均有表达,而ACC、FASN只在初乳中表达,常乳和末乳均未检测到。与初乳相比,常乳和末乳中LPL、CD36、VLDLR、ACSS2、ACSL1、FABP3、SCD、ADFP、XDH和BTN1A1mRNA的转录水平均显著降低(P<0.05),且常乳与末乳间差异不显著(P>0.05)。以上结果与奶牛泌乳曲线基本吻合,提示乳腺脂肪酸合成依赖泌乳阶段,初乳期合成能力明显高于常乳和末乳期乳腺。