联合阻断EGFR和COX-2信号通路靶向治疗在鼻咽癌的实验研究

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目的表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)和环氧化酶—2(Cyclooxygenase-2,COX-2)对鼻咽癌的发生发展起着重要的作用。研制开发不同的EGFR抑制剂及COX—2抑制剂并将其用于鼻咽癌放疗的辅助治疗已成为人们关注的焦点。但单一靶点治疗的疗效不尽满意。本研究用Tarceva(EGFR-酪氨酸激酶拮抗剂)联合C elecoxib(COX-2抑制剂)处理鼻咽癌细胞株CNE-1,CNE-2,观察该联合靶向治疗方案对鼻咽癌细胞的影响。方法用不同浓度的Tarceva(0-40umol/L、)和C elecoxib(0-100umol/L)处理鼻咽癌细胞株CNE-1,CNE-2,通过CCK-8法观察细胞生长抑制率,确定IC50。再用浓度为IC30的Tarceva和c elecoxib单独和联合处理CNE-1,CNE-2细胞,对比单独处理和联合处理时细胞生长抑制率。通过流式细胞术进行细胞周期、凋亡率的分析,western blot检测药物处理前后相关蛋白表达的差异。结果(1)Tarceva和C elecoxib处理的CNE-1,CNE-2细胞后,出现剂量依赖性的生长抑制率增高。Celecoxib处理CNE-1,CNE-2细胞IC50约为25umol/1,Tarceva处理CNE-1细胞IC50约为30umol/l,处理CNE-2细胞IC50约为15umol/l。(2)CNE-1细胞联合用药组细胞生长抑制率与单独处理组细胞的生长抑制率之和比较差异无显著性(P>0.05)。CNE-2细胞联合用药组细胞生长抑制率大于单独处理组细胞的生长抑制率之和(P<0.05)。(3)联合处理组细胞G1期比例大于单独处理组(P<0.05)。联合处理组细胞调亡率与单独处理组细胞的调亡率之和比较差异无显著性(P>0.05)。(4)与单独处理组相比,联合处理组出现明显的p-EGFR,COX-2表达降低。结论(1)阻断EGFR或COX-2信号通路都能抑制鼻咽癌细胞株CNE-1,CNE-2生长,诱导细胞凋亡,将细胞阻滞于G1期。(2)联合阻断EGFR和COX-2信号通路对抑制鼻咽癌细胞株CNE-2生长以及增加G1期阻滞,有协同作用。(3)联合阻断EGFR和COX-2信号通路在抑制鼻咽癌细胞株CNE-2 EGFR的磷酸化和COX-2的表达方面具有协同作用。
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