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作为全球流行率最高的慢性病毒性感染疾病,慢性乙型肝炎病毒感染(Chronic hepatitis B virus infectoin)尚缺乏有效治愈药物。当前主要的抗HBV药物包括干扰素α(IFN-α)和核苷/核苷酸类似物(NAs),两类药物能有效抑制HBV病毒复制并部分控制疾病进展,但仅能在极少部分患者(<5%)中实现临床治愈(HBsAg阴转)。现有研究表明,慢性乙肝感染者体内高水平的HBsAg可能是导致宿主免疫耐受的重要原因,新型Anti-HBV药物的研究应有效降低患者体内HBsAg,助力于宿主Anti-HBV免疫应答恢复,从而有效实现HBsAg阴转。本实验室团队在前期研究中发现了能在HBV小鼠模型中高效清除HBV的E6F6抗体,成功鉴定出了其识别表位HBsAgaa119-125,并将带有该表位的多肽SEQ13(HBsAg-aa113-135)展示于类病毒颗粒载体上,构建出了新型表位嵌合型治疗性乙肝疫苗CR-T3-SEQ13。我们已经在多种动物模型中证明该疫苗具有显著的Anti-HBV治疗效果、良好的免疫原性和安全性。但目前尚缺乏对于CR-T3-SEQ13候选疫苗分子在动物模型中的治疗策略研究,本研究旨在小鼠模型中对CR-T3-SEQ13疫苗的治疗策略进行优化,包括免疫程序的探索以及与现有IFN类药物或NA类药物之间联合治疗的可行性分析,同时也对CR-T3-SEQ13疫苗免疫产生的抗体进行分析鉴定以确定其诱导产生的抗体的表位。本研究主要包含四个部分研究内容。第一份部分研究主要对CR-T3-SEQ13治疗性疫苗的免疫程序进行摸索。通过在HBV转基因小鼠模型中对比评估每周免疫一剂以及每两周免疫一剂两种免疫程序的治疗效果,结果显示其没有显著性区别。第二部分研究CR-T3-SEQ13疫苗与现有的抗乙肝药物核苷类似物(恩替卡韦和替诺福韦)和α干扰素的联合使用,结果显示核苷类似物和干扰素的使用不会显著影响治疗性疫苗的治疗效果。第三部分研究治疗性抗体129G1(该抗体是一株针对HBsAg aa137-151表位的鼠单克隆抗体,已经被验证具有针对HBV的治疗效果)与CR-T3-SEQ13疫苗的联合使用,结果证明129G1可以显著增强疫苗在转基因雌鼠体内的免疫应答。第四部分研究重点对CR-T3-SEQ13疫苗免疫小鼠后诱导产生的抗体进行性质分析。利用CR-T3-SEQ13疫苗免疫BAL B/c小鼠,共计制备了 14株SEQ13表位特异的单克隆抗体,表位分析结果显示这些抗体主要识别E6F6类抗体的结合表位sA(HBsAg-aa121-124)。综上所述,本研究利用乙肝小鼠模型对新型表位嵌合型治疗性疫苗CR-T3-SEQ13进行了治疗策略探索,研究结果表明了 CR-T3-SEQ13疫苗可以与IFN-a、NAs和治疗性抗体129G1等抗乙肝药物进行联合治疗,同时CR-T3-SEQ13疫苗在小鼠中能诱导出特异性针对嵌合表位的抗体。这些研究结果将为CR-T3-SEQ13疫苗未来进一步在临床试验中治疗方案和策略的优化设计提供科学依据和指导。