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目的:1.体外观察哇巴因对T淋巴细胞白血病Jurkat细胞株的凋亡、hTERT、c-myc mRNA及蛋白表达的影响,探讨哇巴因的抗肿瘤作用机制。2.探讨相同浓度哇巴因对正常人BM-MNCs的影响。方法:1.人T细胞急性淋巴细胞白血病(Jurkat细胞株)的培养及正常人骨髓单个核细胞的分离和培养。2.Annexin V/PI双染流式术检测50nmol/L、100nmol/L的哇巴因作用Jurkat细胞及正常人骨髓单个核细胞(BM-MNCs)24h、48h后的凋亡情况。3.Realtime-PCR检测哇巴因作用Jurkat细胞及正常人BM-MNCs后的c-myc及hTERT mRNA的变化情况。4.Western blot方法检测哇巴因作用Jurkat细胞及正常人BM-MNCs后的c-myc及hTERT蛋白表达的变化情况。结果:1.不同浓度哇巴因作用于Jurkat细胞株24h、48h后,对照组、50nmol/L24h组、100nmol/L24h 组、50nmol/L48h 组、100nmol/L48h 组的凋亡率分别为 4.23±1.01%、5.67±3.71%、9.63±4.83%、19.67±4.5%、37.60±11.89%,哇巴因50nmol/L、100nmol/L作用48h的凋亡率与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05);同样浓度及同样作用时间的哇巴因处理正常人BM-MNCs后,对照组、50nmol/L24h、100nmol/L24h、50nmol/L48h、100nmol/L48h 的凋亡率分别为 4.13±0.71%、9.13± 1.71%、12.63±6.93%、12.90±4.42%、15.23±7.07%,加药组与对照组相比差异均无统计学意义(P>0.05)。2.在T淋巴细胞白血病Jurkat细胞株中,c-myc与hTERT的mRNA水平与蛋白表达与正常人BM-MNCs中的相比含量明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。3.不同浓度哇巴因(50nmol/L、100nmol/L)作用于Jurkat细胞株后可使c-mycmRNA、hTERTmRNA的水平较对照组明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。c-myc、hTERT mRNA 二者降低具有正相关性(r=0.97,P=0.03)。相同的哇巴因浓度及相同的作用时间作用于正常人BM-MNCs后c-myc mRNA的水平较对照组表达虽有降低,但是差异无统计学意义(P>0.05);但是哇巴因作用正常人BM-MNCs后hTERTmRNA的水平较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。4.不同浓度哇巴因(50nmol/L、100nmol/L)作用于Jurkat细胞株24h、48h后可使c-myc、hTERT蛋白水平较对照组明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);且c-myc、hTERT蛋白水平二者降低程度具有正相关性(r=0.944,P=0.016)。而不同浓度哇巴因(50nmol/L、100nmol/L)作用正常人BM-MNCs24h及48h后,细胞内c-myc蛋白水平与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05),hTERT蛋白水平与对照组相比除100nmol/L24h组外差异均无统计学意义(P>0.05),100nmol/L24h组与对照组相比升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:1.哇巴因可诱导Jurkat细胞株凋亡,相同浓度及相同作用时间的哇巴因作用于正常人BM-MNCs后凋亡无明显变化。2.c-myc、hTERT的mRNA、蛋白在Jurkat细胞株中的表达较正常人BM-MNCs中均明显增多,可能为Jurkat细胞株的治疗靶标。3.哇巴因可引起Jurkat细胞株中hTERT、c-myc的mRNA及蛋白表达的下调,这可能是哇巴因可诱导Jurkat细胞株凋亡的机理之一。4.哇巴因作用于正常人BM-MNCs后,细胞中c-myc的mRNA及蛋白表达均无变化,hTERT mRNA水平较对照组虽有降低,但是hTERT蛋白表达较对照组无降低。