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实验目的:应用基因芯片技术和蛋白组学技术初步筛选人大肠癌细胞辐射敏感相关基因与蛋白。实验方法:1)、基因组部分:培养2种不同辐射敏感性的人大肠癌细胞LOVO和SW480,收集细胞至少达到107数量级,提取细胞总RNA,采用人全基因组表达谱芯片获得两株细胞的基因表达谱,分析比较两者之间基因的差异表达情况。2)、蛋白组部分:同法培养LOVO细胞和SW480细胞,分别予以0、2、4、6GyX线照射,运用SELDI-TOF蛋白质芯片技术测定照射后24小时细胞的蛋白质谱,分析两株细胞间不同照射剂量后的蛋白质表达情况,通过Swiss-Prot数据库搜索比较两者之间的差异表达。实验结果:1、LOVO细胞组检出基因16882个,SW480细胞组检出基因17114个。2、在2倍以上差异表达基因中筛选出上调基因908个,下调基因1312个。上调基因中包括Fas基因、NFkB基因等,下调基因中包括Caspas6基因、RAD21基因等已有研究证明与辐射敏感相关。3、LOVO细胞中高表达的基因主要有CEACAM5、THBS1、SERPINE2、ARL7、HPGD,提示与辐射敏感相关;SW480细胞中高表达的基因主要有SCD、NQ01、LYZ、KRT20、ATP1B1,提示与辐射抵抗有关。4、两种细胞间差异表达的蛋白质峰共5组,平均质荷比(m/z)分别为3366.87, 4743.52,6077.43,7259.53,9155.45。5、LOVO细胞随辐射剂量增加有梯度变化的蛋白质峰有5组,其平均质荷比(m/z)分别为2478.24,4521.30,5383.82,8454.03,11610.70;SW480细胞随辐射剂量增加有梯度变化的蛋白质峰有4组,其平均质荷比(m/z)分别为5655.29,7472.21,15829.02,17859.47。6、根据平均质荷比,通过Swiss-Prot数据库搜索初步筛选出与肿瘤辐射敏感性高度相关的主要蛋白GADD45B,Thioredoxin, Metallothionein 1(MT1)。7、Thioredoxin在基因表达谱中是下调基因,Metallothionein 1(MT1)在基因表达谱中是上调基因,GADD45B在基因表达谱中属于无变化基因。