水貂绿脓杆菌和大肠杆菌二联四价灭活疫苗的研制及初步应用

来源 :吉林农业大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:scarllie
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随着我国经济的发展,水貂养殖业发展非常迅猛,水貂养殖户数量逐年增加,随之而来的是一些传染病发病率升高,尤其是细菌性呼吸道疾病,给水貂养殖业带来了巨大经济损失,严重影响毛皮动物产业健康发展。水貂出血性肺炎是近年来引起水貂死亡的一种急性、热性、高致死性的细菌性呼吸道传染病。该病最早鉴定为是由绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)单独感染而引起。然而,近年来我们对临床发病病例的研究发现,引起水貂出血性肺炎的病原并不单一是绿脓杆菌,还有大肠杆菌(Escherichia coli),也有大肠杆菌和绿脓杆菌混合感染的情况。为此,多种病原体导致水貂出血性肺炎的发生,并引起水貂急性死亡,给药物防治增加了困难,养殖户的经济损失也日益增加,严重妨碍了我国水貂养殖业的发展。水貂出血性肺炎病例在全国各地区均有发生,主要集中在河北、山东、辽宁、黑龙江等省份。感染的水貂初期看不见任何临床症状,中后期食欲不振、精神萎靡、尖叫后立即死亡、口鼻流血,剖检可见肺脏大面积出血、脾脏、肾脏等器官大出血,使用抗生素治疗效果不理想,尤其是大肠杆菌单独感染的病例对抗生素极容易产生耐药性,可使用的抗生素种类不多。该病目前严重困扰着我国水貂养殖户,为此对我国河北、山东、辽宁和黑龙江等地的水貂出血性肺炎病例进行收集,并开展了病原菌分离鉴定、血清型、基因型鉴定、药敏试验、小鼠和水貂攻毒试验等研究,对水貂出血性肺炎的病原体进行分离鉴定,并对其在实验动物和本源动物的致病性方面进行检测。同时利用分离鉴定的主要致病菌研制了水貂出血性肺炎绿脓杆菌和大肠杆菌二联四价灭活疫苗,并对该疫苗的免疫原性和免疫保护力进行了检测,并在临床上进行了初步应用。通过以上研究,我们得到了如下研究结果:(一)病原菌分离鉴定试验结果显示,引起水貂出血性肺炎的病原体主要有绿脓杆菌和大肠杆菌两种重要的病原体,有的是单独感染,有的是混合感染。引起水貂出血性肺炎的绿脓杆菌的血清型除了已有的G型外,还有D型和E型,其中以G型、D型和E型为多发,并且致病力较强。引起水貂出血性肺炎的大肠杆菌的基因型为H11,且具有较强的致病力。(二)对小鼠和水貂攻毒试验显示分离到的菌株均可以引起小鼠和水貂死亡,并引起水貂出现典型的出血性肺炎临床症状,病理切片结果显示出现明显的炎症反应。(三)药敏试验结果显示分离到的绿脓杆菌和大肠杆菌具有高度的耐药性,其中绿脓杆菌对头孢噻肟、头孢他啶产生高度耐药,对环丙沙星、妥布霉素、阿米卡星等7种抗生素敏感,大肠杆菌对环丙沙星、妥布霉素、阿米卡星、头孢噻肟、头孢他啶等10种抗生素均产生高度耐药。(四)利用大肠杆菌H基因型菌株和绿脓杆菌G型、D型和E型血清型菌株研制水貂出血性肺炎二联四价灭活疫苗,并进行临床初步应用,结果显示该疫苗在预防水貂因大肠杆菌和绿脓杆菌而引起的出血性肺炎具有良好的保护力。免疫水貂21日后,进行攻毒,5只水貂全部被保护,同时对临床上7000只水貂进行免疫,结果该疫苗无不良反应,并起到了很好的保护作用,免疫后水貂无出血性肺炎疾病发生。通过以上研究,我们明确了当前引起我国水貂出血性肺炎的主要病原体及其感染和流行情况,并对这些病原体的血清型和基因型以及致病性和耐药性均进行了鉴定,并研制了适合我国水貂出血性肺炎防控的多价灭活疫苗,为我国水貂出血性肺炎的防控提供了技术保障。
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