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疟疾是经按蚊叮咬而感染疟原虫所引起的传染病,严重危害人类健康。能感染人的疟原虫有5种,其中恶性疟原虫的毒力最强,致死率最高。红内期恶性疟原虫寄生于人成熟红细胞中,这导致它们之间存在错综复杂的相互作用关系。microRNAs是种广泛存在于真核生物中的长度-22nt的单链非编码RNA,其在细胞质中与Dicer、Argonaute(AGO)等蛋白形成复合物而诱导基因沉默,主要通过碱基互补配对与靶基因mRNA的UTR或者CDS结合,使靶mRNA脱腺苷化、降解和抑制翻译。最近,LaMonte等人的研究显示宿主miRNA-451和let-7i移位到红内期恶性疟原虫虫体中,与恶性疟原虫PKA-R转录本发生嵌合来抑制调节性PKA亚基的翻译,进而抑制虫体的生长；同样,在鼠中,发现鼠的miR-155能够增强小鼠对疟原虫的免疫力：在冈比亚按蚊中,冈比亚按蚊的aga-miR-305能够提高冈比亚按蚊对疟疾虫的免疫力。这些研究结果都表明宿主microRNAs能对疟原虫基因进行调控来对抗疟疾。人miR-185是本实验室在恶性疟原虫3D7里发现的宿主miRNA之一,且含量很高,通过预测得知其和var (pfl1955w)的dbl序列靶向互补,提示人miR-185可能调控恶性疟原虫var基因和功能。有相关文献报道称,人miR-185在对肿瘤和代谢性疾病的调控起重要作用,如miR-185负向调控雄激素受体抑制前列腺癌细胞；miR-185靶向原癌基因Sixl抑制肿瘤的生长,靶向SOCS3基因抑制糖尿病功能紊乱等等。为了探讨人miR-185对恶性疟原虫var (pfl1955w)基因表达调控并观察感染红细胞粘附所受到的影响,我们体外培养293T细胞和恶性疟原虫3D7,构建双荧光素酶报告质粒和表达质粒,再分别用Lipofectamine 2000转染293T细胞和Cytomix电转到恶性疟原虫3D7,流式细胞仪检测转染效率,用双荧光素酶报告验证人miR-185对var(pfl1955w)的dbl区域直接调控作用,Q-PCR检测var (pfl1955w) mRNA的表达,细胞粘附实验检测感染红细胞的粘附。结果显示,转染293T细胞和恶性疟原虫3D7的效率在50%以上；过表达人miR-185可显著抑制含var (pfl1955w) dbl的荧光素酶基因的表达(p<0.001)；在293T细胞和恶性疟原虫3D7中,过表达人miR-185能够减少·var (pfl1955w)mRNA的含量(p<0.05),并使感染红细胞粘附作用下降了39%。综上表明,人miR-185对疟原虫var(pfl1955w)基因表达有下调作用,进而影响恶性疟原虫的粘附。