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目的:成釉细胞瘤(AB)是一种发病率约占牙源性肿瘤10%的口腔良性肿瘤,主要发生在下颌骨。在2017版WHO头颈部肿瘤最新分类中被分为经典型、单囊型、骨外/外周型和转移性成釉细胞瘤。AB的本质是良性的,但有局部侵袭性和高复发风险。目前关于其肿瘤细胞的增殖、分化、抑瘤基因、破骨机制、信号分子的表达及相关信号通路等有很多学者进行了研究,但其确切的发生发展机制仍不十分清楚。eIF3在哺乳动物中其分子量约为550~700kDa,由13个亚基组成,eIF3a~eIF3m。其中最大的亚基——eIF3a具有许多生物学功能,如参与翻译起始、细胞周期调控、增殖和分化等。它可以调节某些特定蛋白mRNA的翻译,并在调控细胞周期和增殖的过程中发挥重要作用。许多文献报道eIF3a的表达与肿瘤的发生和发展密切相关。miRNA调控着人类近30%的基因,在一些基本的细胞生物学进程,如生长、分化和凋亡中都与肿瘤的发生发展密不可分。miR-424-5p是miR-15家族的成员,许多研究均发现其在肿瘤的发生发展过程中发挥着非常重要的作用。为了探明eIF3a、miR-424-5p在AB的增殖、凋亡和迁移等生物学性能中的作用及其调控对AB所造成的影响,我们将用三部分实验来加以阐述。研究方法:本论文中,我们首先利用IHC方法检测和分析了eIF3a在AB(N=83)和NOM(N=20)组织中的差异表达情况。提取AB(N=30)和NOM(N=6)组织的总RNA和总蛋白后,我们分别利用RT-qPCR和WB等方法对eIF3a在AB和NOM中的mRNA和蛋白水平的表达情况进行了比较分析。同时,我们对eIF3a在AB中的表达与其临床/病理特征进行了相关性分析。慢病毒载体ShRNA转染AM-1细胞后,我们使用MTT、细胞克隆形成和流式细胞技术分别检测了eIF3a基因对AM-1细胞增殖和凋亡能力的影响。随后,根据我们所之前所得到的miRNA基因表达谱分析结果,结合数据库和网站对eIF3a可能存在靶基因结合位点的miRNA进行分析,预测miR-424-5p可能与eIF3a存在靶向结合,最后通过双荧光素酶报告基因进行了验证。除此之外,我们应用RT-qPCR(加尾法)方法对miR-424-5p在AB(N=30)和NOM(N=6)组织中的表达情况也进行了检测和分析,并在miR-424-5p mimics//NC转染后对AM-1细胞的相关细胞表型变化进行了研究,分析其过表达后是否对AB的生物学性能产生影响。最后,我们应用RT-qPCR和WB等方法对miR-424-5p与eIF3a之间的调控作用进行了检验和分析,并对P21和Cyclin D1等细胞周期蛋白的表达是否受eIF3a和miR-424-5p的调控进行了研究,从而进一步证明miR-424-5p能够介导eIF3a对AB的生物学性能产生影响。结果:与NOM相比,eIF3a在AB组织的细胞质和细胞膜中多以强阳性表达为主,并且其表达无论在mRNA水平还是蛋白水平均呈现明显上调。本研究样本中AB的类型主要以经典型AB为主。女性eIF3a的表达水平高于男性,其他临床/病理相关因素如年龄,发生部位和复发情况等均未见明显差异。慢病毒shRNA转染AM-1细胞后,细胞克隆形成实验和MTT实验均证实eIF3a敲减后能够明显抑制AM-1细胞的增殖功能和细胞活力。同时,流式细胞术的检测结果显示eIF3a敲减后能够明显促进AM-1细胞的凋亡。双荧光素酶报告基因验证miR-424-5p与eIF3a存在靶基因结合位点,并且miR-424-5p在AB组织中的表达处于下调状态。此外,miR-424-5p转染mimics后对AB的增殖和迁移能力的均显示出明显的抑制作用,同时可以负向调控eIF3a的表达。两者均能对细胞周期相关蛋白P21和Cyclin D1的表达造成影响,并对AM-1的细胞周期发挥明显的调控作用。结论:eIF3a在AB组织中无论在mRNA水平还是蛋白水平都处于高表达状态,敲减eIF3a基因后能够明显抑制AM-1细胞的增殖能力和细胞活力,同时促进其凋亡功能。miR-424-5p与eIF3a经双荧光素酶报告基因验证,两者具有靶基因结合位点,并在AB组织中处于下调表达状态。miR-424-5p过表达后能够对AM-1细胞的增殖和迁移能力产生明显的抑制作用,并可以在mRNA和蛋白水平负向调控eIF3a的表达,同时参与AM-1细胞的周期调控。