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背景和目的缺血性脑血管疾病的病理损伤机制极为复杂。近年来的研究发现了一些具有神经保护作用的因子，在缺血性脑血管疾病的恢复过程中发挥着重要作用。其中，神经生长因子(nerve growth factor, NGF)与脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor, BDNF)二者属于神经生长因子家族，也称神经营养素(NTs)。两者能够促进中枢神经系统的发育，对于神经系统中成熟神经元的正常功能的维持也是非常必要的。Shh信号通路在胚胎发育及神经系统发育过程中扮演十分重要的角色。实验研究证实，脑缺血后激活Shh信号通路可以促进室下区(subventricular zone,SVZ)神经元细胞的再生。Shh信号通路由以下几部分组成：Shh蛋白、Ptch蛋白、Smo蛋白和锌指转录因子Gli蛋白。Shh信号通路被激活以后，Shh和Ptch结合，解除Smo的抑制效应，Smo促使Gli蛋白进入细胞核，目的基因从而被诱导。下游靶基因Gli蛋白的表达将增加，因此可以将Gli蛋白作为Shh信号是否激活的标志。本实验通过线栓法制作永久性大脑中动脉缺血模型，通过免疫组化学法检测缺血脑组织中NGF、BDNF的表达，观察Purmorphamine特异激活Shh信号通路后NGF、 BDNF的变化进而论述激活Shh信号通路在脑缺血中的神经保护作用。材料与方法选取SD大鼠，运用线栓法制作永久性大脑中动脉缺血模型（MCAO）。选取健康成年雄性SD大鼠110只，SPF级，体重190～250g。实验分组如下：假手术组（A组）；缺血组（B组）；药物干预组（C组）。其中，假手术组10只，缺血组和药物干预组按照时间点的不同可分为5个亚组即6h，24h，48h，72h，7天，每个亚组10只。假手术组只分离血管不插线栓。缺血组和药物干预组采用线栓法造模。药物干预组在造模成功后立即腹腔注射Purmorphamine溶液（0.691mg/kg）。Purmorphamine溶液配制方法：溶于有机溶剂二甲基甲酰胺（DMF），并且完全溶解。假手术组和缺血组给予同等剂量的DMF。成功造模后，观察实验动物是否具有神经缺损症状，依据标准评分法，评分不达标的动物均弃之不用，排除出组的动物在后续的试验中予以补充。于既定时间点，取出脑组织标本。免疫组化法检测缺血侧脑组织的NGF、BDNF的表达，逆转录聚合酶反应（Real-time PCR）检测缺血侧脑组织Gli-1mRNA的表达。数据处理采用SPSS21.0统计软件处理数据，所有结果均采用均数±标准差(±s)表示。组间比较用单因素方差分析，两两比较用LSD检验，检验水准：a=0.05。结果1.各组NGF的表达情况假手术组有少量NGF表达。缺血组、药物干预组在缺血后6小时即有表达。24小时表达明显增多，在缺血72小时达到峰值，之后呈下降趋势。缺血组、药物干预组和假手术组相比，NGF表达明显增多，差异具有统计学意义(P<0.05)。药物干预组和缺血组各时间点相比，NGF表达明显增多，差异具有统计学意义(P <0.05)。2.各组BDNF的表达情况假手术组有少量BDNF表达。缺血组、药物干预组在缺血后6小时即有表达。至72小时达到峰值，之后呈下降趋势。缺血组、药物干预组和假手术组相比，BDNF表达明显增多，差异具有统计学意义(P <0.05)。药物干预组和缺血组各时间点相比，BDNF表达明显增多，差异具有统计学意义(P <0.05)。3.各组Gli-1mRNA的表达情况假手术组有少量Gli-1mRNA表达。缺血组、药物干预组在缺血后6小时即有表达。24小时表达明显增多，之后呈下降趋势。缺血组、药物干预组和假手术组相比，Gli-1mRNA表达明显增多，差异具有统计学意义(P <0.05)。药物干预组和缺血组各时间点，Gli-1mRNA表达明显增多，差异具有统计学意义(P<0.05)。结论1.外源性给予Purmorphamine后，可以有效激活Shh信号通路。2. Shh信号通路被有效激活后，可以促进脑缺血组织中NGF和BDNF的表达，从而发挥神经修复作用。