背景与目的在睾丸组织中,血睾屏障（blood-testis barrier,BTB）主要是由相邻的支持细胞紧密连接复合体所构成的。BTB形成一个免疫保护腔区域环境使得精母细胞在此进行减数分裂,最终形成精子,所以其对维持精子的生成十分重要^[1]。CLAUDIN-11最早由Bronstein等^[2]在脑的少突胶质细胞中发现。CLAUDIN-11是构成睾丸支持细胞紧密连接复合体的主要组成成分。动物实验研究显示CLAUDIN-11是维持哺乳动物血睾屏障正常功能,从而维持正常生精功能所必须的。目前对睾丸生精障碍的机制已进行了不少研究,但其发病机制至今仍未完全阐明。MUSASHI-1简称MSI-1,是一种分子量为39KD的RNA结合蛋白。MUSASHI-1首先是在果蝇中发现,在线虫^[3]、果蝇^[4]和脊椎生物^[5]的表达具有较高保守性。其被认为是一种具有干细胞特性的标志物^[6]。MUSASHI-1在胎儿期和成年期的哺乳动物的中枢神经系统中强烈表达,其在维持干细胞状态,分化,肿瘤的发生和发展具有重要作用^[7]。MUSASHI-1被鉴定为果蝇睾丸生殖细胞发育和减数分裂的关键调节因子,其在小鼠的精子发生中同样至关重要^[8]。MUSASHI-1在睾丸组织中的表达水平的变化可能与生精功能的变化相关。本研究旨在检测紧密连接蛋白CLAUDIN-11、RNA结合蛋白MUSASHI-1在不同病理分型的非梗阻性无精子症（no-obstructive azoospermia,NOA）患者睾丸组织中的表达,探讨其在成年男性NOA发病过程中所起的作用。材料与方法1研究对象选取62例原发性NOA患者,年龄分别在22-45周岁之间。取其睾丸组织进行HE染色,根据镜下细胞学分析描述,按精子发生能力低下（hypospermatogenesis,HS）和唯支持细胞综合征（sertoli cell only syndrome,SCO）两种类型分为HS组和SCO组。其中HS组30例,SCO组32例。所有患者术前均无泌尿生殖系统感染,无染色体异常,无系统性疾病,术前3个月内,未接受任何抗感染治疗和激素治疗。2研究方法对上述62例睾丸组织采用免疫组化检测睾丸组织中CLAUDIN-11、MUSASHI-1的表达情况;通过实时荧光PCR检测睾丸组织中CLAUDIN-11mRNA、MUSASHI-1 mRNA的表达;生殖激素的测定,检测62例患者手术当日清晨空腹血清中LH、PRL、FSH、E2、T。3统计学方法采用SPSS 22进行统计分析。正态分布的计量资料以均数±标准差（?x±s）表示,非正态分布的计量资料以中位数±四分位数间距表示,若数据符合正态分布且方差齐,均数之间比较采用t检验;否则采用两独立样本秩和检验,检验水准α=0.05。结果1.1 CLAUDIN-11免疫组化免疫组化检测CLAUDIN-11在生精小管中的表达HS组CLAUDIN-11的表达主要集中在生精小管管壁周围的支持细胞中,而SCO组CLAUDIN-11弥漫性分布于生精小管内的支持细胞膜。1.2 CLAUDIN-11 mRNA表达CLAUDIN-11 mRNA表达:HS组和SCO组CLAUDIN-11 mRNA的相对表达量均符合正态分布,HS组表达水平为（0.008±0.001）,低于SCO组（0.013±0.002,t=10.616,P<0.01）,差异有统计学意义。2.1 MUSASHI-1免疫组化免疫组化检测MUSASHI-1在两组的表达在曲细精管内的支持细胞胞核和胞浆中均呈阳性表达。而MUSASHI-1在HS组的精原细胞和粗线期精母细胞均有阳性表达。2.2 MUSASHI-1 mRNA表达MUSASHI-1 mRNA表达:HS组和SCO组MUSASHI-1 mRNA的相对表达量均符合正态分布,在HS组表达水平为（0.084±0.012）,低于SCO组（0.126±0.024,t=9.14,P<0.01）,差异有统计学意义。3生殖激素五项FSH在HS组表达为（5.36±2.80）IU/L,低于SCO组[（10.65±9.18）IU/L,t=3.11,P<0.05],差异有统计学意义。LH在HS组表达为（3.62±1.34）IU/L,低于SCO组[（4.96±3.10）IU/L,t=2.23,P<0.05],差异有统计学意义。E2、PRL、T在两组中差异均无统计学意义。两组患者的年龄差异均无统计学意义。结论CLAUDIN-11在睾丸支持细胞上的表达上调,对支持细胞紧密连接的正常功能有负面影响,对正常生精有害。CLAUDIN-11在睾丸支持细胞上的表达上调在原发性非梗阻性无精子症疾病的发生发展中起促进作用。MUSASHI-1在人睾丸组织支持细胞、精原细胞和初级精母细胞中均有表达。MUSASHI-1的过度表达状态,在原发性非梗阻性无精子症疾病发生发展中可能起促进作用。