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目的:观察不同的干预时间下电针梁门——足三里对消化性溃疡(Peptic ulcer,PU)大鼠胃黏膜的治疗作用,利用组织病理学和分子生物学检测结果分析并评估电针治疗消化性溃疡的时效性关系。方法:选用Sprague-Dawley级别的雄性大鼠72只,按随机数字表法将72只大鼠分为4组:空白组、模型组、胃经穴组和胆经穴组,并将每组根据干预时间的不同分为1d、4d、7d三个亚组,每个亚组6只。采用70%乙醇(4ml/kg体质量)从口腔灌胃制备PU模型。造模结束后,取出大鼠胃组织并平均分为3份,一份放入4%的多聚甲醛固定48h,用于HE染色;另外两份组织则使用液氮冻存1h后放入-80℃冰箱备用,分别用于实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测和Western blot检测。通过观察不同的干预时间下电针“梁门穴”和“足三里穴”对消化性溃疡大鼠胃黏膜的形态学变化和相关脑肠肽的动态表达,探讨电针治疗消化性溃疡的时效关系和相关的分子机制。(2)结果:(1)大鼠胃溃疡指数:1 d后,模型组、胃经穴组及胆经穴组大鼠胃溃疡指数皆高于空白组(均P<0.01),但胃经穴组指数低于模型组和胆经穴组(均P<0.05);干预4 d后,模型组和胆经穴组溃疡指数有所降低但仍高于空白组(均P<0.05),而胃经穴组溃疡指数低于模型组和胆经穴组(均P<0.05);干预7 d后,各组溃疡指数基本恢复正常水平(均P>0.05)。(3)大鼠胃粘膜组织形态学:干预1d后的模型组、胃经穴组和胆经穴组的胃黏膜上皮皆损伤明显,大量的细胞脱落、坏死,并且胃经穴组与胆经穴组胃黏膜无明显差异。干预4d后,模型组的胃黏膜上皮结构仍然损伤较严重,而胃经穴组的黏膜结构恢复较为完整,与同期模型组对比,有明显改善,但差异不明显。干预7d后的模型组与前期相比明显改善,胃经穴组与胆经穴组大鼠胃黏膜上皮结构恢复完整,与空白组基本一致。(4)大鼠胃黏膜PCNA mRNA、SP mRNA的表达:模型组、胃经穴组和胆经穴组在干预1d后与空白组相比,胃黏膜PCNA、SP表达量均明显降低(P<0.01,P<0.05),但胃经穴组的含量高于模型组和胆经穴组(均P<0.05)。干预4d后,模型组、胆经穴组PCNA、SP表达上升并显著高于空白组(均P<0.01);胃经穴组SP表达亦增加但低于模型组和胆经穴组(均P<0.05);而胃经穴组PCNA表达显著低于模型组、胆经穴组(均P<0.01)并接近空白组(P>0.05);干预7 d后,各组PCNA、SP表达比较差异无统计学意义(均P>0.05)。(4)大鼠胃黏膜NT、Ghrelin和Survivin蛋白的表达:(1)胃黏膜NT蛋白在干预1 d后,模型组的含量低于空白组、胆经穴组(均P<0.05)。胃经穴组NT表达显著高于空白组、模型组和胆经穴组(均P<0.01)。干预4 d后,模型组、胃经穴组和胆经穴组NT表达差异无统计学意义(均P>0.05),且皆高于空白组(均P<0.01)。干预7 d后,各组间比较差异无统计学意义(均P>0.05)。(2)胃黏膜ghrelin蛋白在干预1d后,模型组表达明显低于空白组(P<0.01);胃经穴组与胆经穴组表达相对模型组均升高(P<0.05)。干预4d后,模型组ghrelin表达无明显变化(P>0.05);胃经穴组和胆经穴组ghrelin表达皆升高(P<0.01,P<0.05)。干预7d后,模型组和胃经穴组ghrelin表达开始升高(P<0.05),胆经穴组表达无明显差异(P>0.05)。(3)胃黏膜survivin蛋白在干预1d后,模型组表达升高(P>0.05);胃经穴组表达升高(P<0.05),胆经穴组则无明显差异(P>0.05)。干预4d后,模型组survivin表达开始降低(P<0.05);胃经穴组和胆经穴组表达均升高(P<0.01,P<0.05)。干预7d后,模型组survivin表达降低(P<0.05),而胃经穴组与胆经穴组survivin表达均升高(P<0.05)。结论:电针胃经穴对消化道溃疡损伤后的增殖和修复机制是由多种因素介导、多物质及通路协同参与,且在大鼠机体自我愈合功能的干预下,其过程十分复杂,结合不同干预时间对PCNA、SP、NT、Ghrelin和Survivin上调或下调,得出脑肠肽动态变化的趋势,为继续深入研究电针治疗消化性溃疡的作用机制做好铺垫。