【目的】
　　1.检测去SUMO化蛋白酶SENP1在瘢痕疙瘩皮损中的表达和分布情况。
　　2.比较不同缺氧时间下，瘢痕疙瘩成纤维细胞（KF）和正常成纤维细胞（NF）中SENP1的表达。
　　3.应用基因沉默技术和基因过表达技术，研究KF细胞中SENP1对HIF-1α和胶原蛋白（CollagenⅠ、CollagenⅢ）表达的影响。
　　【方法】
　　1.检测瘢痕疙瘩皮损和正常皮肤组织中SENP1的表达：收集10例瘢痕疙瘩的患者皮损作为实验组，10例正常人皮肤组织作为对照组，应用免疫组化染色技术检测SENP1蛋白在两组组织中的分布和表达情况。
　　2.体外培养人源成纤维细胞，低氧处理以模拟体内缺氧微环境，检测低氧对成纤维细胞中SENP1表达的影响：用组织块贴壁法分离出KF细胞和NF细胞进行原代和传代培养，在光镜下观察细胞形态，将第4或第5代生长状态良好的成纤维细胞放置于三气培养箱中（内含1%O2、5%CO2、94%N2）予低氧处理，根据低氧暴露时间的长短分为常氧组、缺氧6h组、缺氧24h组，应用WesternBlot实验检测三组中SENP1的蛋白表达量。
　　3.敲低SENP1后检测其对HIF-1α、CollagenⅠ和CollagenⅢ蛋白表达的影响：应用siRNA基因干扰技术敲低KF细胞中SENP1基因的表达，并在低氧（1%O2）环境下进行培养，用WesternBlot实验检测对照组（si-NC）和敲低组（si-SENP1-001和si-SENP1-002）中SENP1、HIF-1α、CollagenⅠ和CollagenⅢ的蛋白表达量。
　　4.构建过表达SENP1稳转细胞系，进一步研究SENP1对KF细胞中HIF-1α、CollagenⅠ和CollagenⅢ蛋白表达的影响：构建pCDH-SENP1-Flag质粒和pCDH-SENP1-HA质粒，分别转染至HEK293T细胞中产生慢病毒，然后用于感染KF细胞并筛选出SENP1-Flag过表达细胞系和SENP1-HA过表达细胞系，分别在常氧和低氧环境下培养，用WesternBlot实验检测对照组（Emptyvector和Control）和过表达组（SENP1-Flag和SENP1-HA）中SENP1、HIF-1α、CollagenⅠ和CollagenⅢ的蛋白表达量。
　　【结果】
　　1.瘢痕疙瘩皮损处SENP1的蛋白表达较正常皮肤组织明显上调，表皮和真皮全层均可见，主要分布于角质形成细胞、成纤维细胞、血管内皮细胞、皮脂腺和一些炎症细胞中。
　　2.在KF细胞中，缺氧6h组和缺氧24h组SENP1的蛋白表达水平均高于常氧组，且随缺氧时间增加呈上升趋势；在NF细胞中，常氧组、缺氧6h组和缺氧24h组中SENP1的蛋白表达无显著差异。
　　3.敲低KF细胞中SENP1基因后，si-SENP1-001组、si-SENP1-002组中SENP1的mRNA水平和蛋白表达水平均低于si-NC组；且在缺氧条件下，si-SENP1-001、si-SENP1-002组中HIF-1α、CollagenⅠ、CollagenⅢ的蛋白表达均低于si-NC组。
　　4.过表达KF细胞中SENP1后，SENP1-Flag组、SENP1-HA组中SENP1在mRNA水平和蛋白水平的表达均高于Emptyvector组和Control组；在常氧和缺氧条件下，SENP1-Flag组、SENP1-HA组中CollagenⅠ、CollagenⅢ蛋白表达均高于Emptyvector组和Control组，HIF-1α的蛋白表达在四组中无明显差异。
　　【结论】
　　1.瘢痕疙瘩患者皮损中SENP1表达增加，提示SENP1可能参与了瘢痕疙瘩的发生发展。
　　2.缺氧能使KF细胞中SENP1和HIF-1α蛋白表达上调，敲低SENP1导致缺氧后HIF-1α应激上调的能力被抑制。
　　3.在KF细胞中，SENP1能够促进CollagenⅠ、CollagenⅢ的蛋白表达，但可能不完全依赖于HIF-1α信号通路。