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第一部分健脾益气通窍法对AR模型大鼠干预作用的实验研究目的:观察健脾益气通窍法对过敏性鼻炎模型大鼠的干预效果,探讨健脾益气通窍法对AR模型大鼠血清IL-5、IL-1β、TNF-α的抑制作用。材料与方法:96只SD大鼠适应性饲养一周后,采用随机数字法将96只大鼠随机分为两组:空白对照组(B组,16只)和造模组(M组,80只)。然后采用卵蛋白腹腔注射致敏、鼻腔滴注激发的方法复制过敏性鼻炎大鼠模型。模型复制成功后,将造模组80只大鼠再次按照随机数字法分为五组:模型对照组(MC组,16只);健脾益气组(MJ组,16只);通窍组(MT组,16只);健脾益气通窍组(MJT组,16只)。西药对照组(MX组,16只)。末次给药后2h,观察各组大鼠的一般症状,采用HE染色法,观察各组大鼠鼻粘膜组织病理变化,采用ELISA法检测各组大鼠血清中IL-5、IL-1β、TNF-α含量。结果:1.各组大鼠一般状态观察显示,空白对照组大鼠活动度良好,未见明显的过敏表现。模型对照组大鼠过敏症状表现最为明显,主要有搔抓鼻面部,流涕,喷嚏等症状。各治疗组症状均有明显的减轻。以西药组和健脾益气通窍组大鼠症状改善最为明显。2.各组大鼠鼻粘膜病理变化显示:空白对照组大鼠鼻粘膜排列整齐,未见异常。模型对照组大鼠鼻粘膜炎症反应较为严重,可见大量嗜酸性粒细胞浸润,炎性表现明显。其余各治疗组大鼠病理改变均显著减轻,西药组和健脾益气通窍组改变最为明显。3.各组大鼠血清中IL-5、IL-1β、TNF-α含量检测结果显示:与空白对照组比较,其余五组大鼠血清中IL-5、IL-1β、TNF-α含量显著升高,有统计学差异(p<0.01);与模型对照组比较,各治疗组大鼠血清中IL-5、IL-1β、TNF-α含量均不同程度降低,差异有统计学意义(p<0.01或0.05);健脾益气组与通窍组大鼠血清中IL-5、IL-1β、TNF-α含量比较无统计学意义;健脾益气通窍组与西药组大鼠血清中IL-5、IL-1β、TNF-α含量比较无统计学意义。结论:1.健脾益气通窍方可明显改善过敏性鼻炎的症状,减轻过敏性鼻炎模型大鼠鼻粘膜病理改变,单独采用健脾益气或通窍疗法,虽然具有一定疗效,但效果不及健脾益气通窍方明显。2.过敏性鼻炎模型大鼠血清中IL-5、IL-1β、TNF-α含量显著升高,健脾益气通窍法可有效抑制这些炎性细胞因子的表达,单独采用健脾益气或通窍疗法,虽然对大鼠血清中IL-5、IL-1β、TNF-α的表达具有一定的抑制作用,但不及健脾益气通窍法明显。第二部分健脾益气通窍法对AR模型大鼠p38 MAPK信号通路影响的实验研究目的:通过检测健脾益气通窍法干预的AR模型大鼠鼻粘膜组织中p38 MAPK及ATF-2表达水平及磷酸化水平的影响,探讨健脾益气通窍方对AR模型大鼠p38 MAPK信号转导通路的调节作用。材料与方法:80只SD大鼠适应性饲养一周后,采用随机数字法将80只大鼠随机分为两组:空白对照组(B组,16只)和造模组(M组,64只)。然后采用卵蛋白腹腔注射致敏、鼻腔滴注激发的方法复制过敏性鼻炎大鼠模型。模型复制成功后,将造模组64只大鼠再次按照随机数字法分为四组:模型对照组(MC组,16只);健脾益气组(MJ组,16只);通窍组(MT组,16只);健脾益气通窍组(MJT组,16只)。采用western-blot法检测大鼠鼻粘膜组织中p38 MAPK、ATF-2、p-p38 MAPK、p-ATF-2蛋白表达水平;采用RT-PCR法检测大鼠鼻粘膜组织中p38 MAPK m RNA、ATF-2m RNA表达水平。结果:1.与空白对照组比较,其余各组大鼠鼻粘膜组织中p38 MAPK、p-p38 MAPK、ATF-2、p-ATF-2蛋白表达显著上调,有统计学差异(p<0.01);与模型对照组比较,各治疗组大鼠粘膜组织中p38 MAPK、p-p38 MAPK、ATF-2、p-ATF-2蛋白表达显著下调,有统计学差异(p<0.01);但健脾益气组与通窍组组间比较无统计学差异(p>0.01);与健脾益气组和通窍组比较,健脾益气通窍组大鼠粘膜组织中p38 MAPK、p-p38 MAPK、ATF-2、p-ATF-2蛋白表达显著下调,有统计学差异(p<0.01)。2.与空白对照组比较,其余各组大鼠鼻粘膜组织中p38 MAPK m RNA、ATF-2m RNA表达显著上调,有统计学差异(p<0.01);与模型对照组比较,各治疗组大鼠粘膜组织中p38 MAPK m RNA、ATF-2m RNA表达显著下调,有统计学差异(p<0.01);但健脾益气组与通窍组组间比较无统计学差异(p>0.01);与健脾益气组和通窍组比较,健脾益气通窍组大鼠粘膜组织中ATF-2、p-ATF-2蛋白表达显著下调,有统计学差异(p<0.01)。结论:1.过敏性鼻炎模型大鼠鼻粘膜组织中p38 MAPK、ATF-2蛋白及基因表达水平升高,p38MAPK、ATF-2蛋白被活化。2.健脾益气通窍法能够下调p38 MAPK、ATF-2蛋白及基因的表达水平,抑制p38 MAPK、ATF-2的磷酸化程度。3.健脾益气通窍法可能是通过抑制p38 MAPK信号通路的激活而实现下调过敏性鼻炎模型大鼠血清致炎因子水平的作用。第三部分健脾益气通窍法对AR模型大鼠NF-κB信号通路影响的实验研究目的:通过检测健脾益气通窍方干预的AR模型大鼠鼻粘膜组织中NF-κB p65及NF-κB p50表达水平及磷酸化水平的影响,探讨健脾益气通窍方对AR模型大鼠NF-κB信号转导通路的调节作用。材料与方法:80只SD大鼠适应性饲养一周后,采用随机数字法将80只大鼠随机分为两组:空白对照组(B组,16只)和造模组(M组,64只)。然后采用卵蛋白腹腔注射致敏、鼻腔滴注激发的方法复制过敏性鼻炎大鼠模型。模型复制成功后,将造模组64只大鼠再次按照随机数字法分为四组:模型对照组(MC组,16只);健脾益气组(MJ组,16只);通窍组(MT组,16只);健脾益气通窍组(MJT组,16只)。采用western-blot法检测大鼠鼻粘膜组织中NF-κBp65、NF-κBp50、p-NF-κBp65、p-NF-κBp50蛋白表达水平;采用RT-PCR法检测大鼠鼻粘膜组织中NF-κBp65、NF-κBp50 m RNA表达水平;采用免疫荧光双标法检测大鼠鼻粘膜组织中NF-κBp65、NF-κBp50蛋白表达水平及定位;采用ELISA法检测大鼠血清中IL-6、IL-8、ICAM-1、VCAM-1含量。结果:1.与空白对照组比较,其余各组大鼠鼻粘膜组织中NF-κBp65、p-NF-κBp65、NF-κBp50、p-NF-κBp50蛋白表达显著上调,有统计学差异(p<0.01);与模型对照组比较,各治疗组大鼠粘膜组织中NF-κBp65、p-NF-κBp65、NF-κBp50、p-NF-κBp50蛋白表达显著下调,有统计学差异(p<0.01);但健脾益气组与通窍组组间比较无统计学差异(p>0.01);与健脾益气组和通窍组比较,健脾益气通窍组大鼠粘膜组织中NF-κBp65、p-NF-κBp65、NF-κBp50、p-NF-κBp50蛋白表达显著下调,有统计学差异(p<0.01)。2.与空白对照组比较,其余各组大鼠鼻粘膜组织中NF-κBp65 m RNA、NF-κBp50 m RNA表达显著上调,有统计学差异(p<0.01);与模型对照组比较,各治疗组大鼠粘膜组织中NF-κBp65 m RNA、NF-κBp50 m RNA表达显著下调,有统计学差异(p<0.01);但健脾益气组与通窍组组间比较无统计学差异(p>0.01);与健脾益气组和通窍组比较,健脾益气通窍组大鼠粘膜组织中NF-κBp65 m RNA、NF-κBp50 m RNA表达显著下调,有统计学差异(p<0.01)。3.与空白对照组比较,其余各组大鼠血清中IL-6、IL-8、ICAM-1、VCAM-1含量显著增高,有统计学差异(p<0.01);与模型对照组比较,各治疗组大鼠血清中IL-6、IL-8、ICAM-1、VCAM-1含量显著降低,有统计学差异(p<0.01);但健脾益气组与通窍组组间比较无统计学差异(p>0.01);与健脾益气组和通窍组比较,健脾益气通窍组大鼠血清中IL-6、IL-8、ICAM-1、VCAM-1含量显著降低,有统计学差异(p<0.01)。结论:1.过敏性鼻炎发病过程中,可能伴随着NF-κB信号通路的激活,促进炎性细胞因子的合成和分泌。2.健脾益气通窍法对过敏性鼻炎的干预效果和抗炎作用可能是通过抑制NF-κB信号通路而实现的。