论文部分内容阅读
研究目的探讨双氢青蒿素(DHA)对体外培养人卵巢癌SKOV-3细胞增殖和凋亡的影响,探讨DHA对卵巢癌SKOV-3细胞生长的作用机制。研究方法采用卵巢癌SKOV-3为研究对象,分为对照组和DHA组,其中对照组为RPMI 1640培养液,DHA组分为5、10、20、40、80μmol／L不同的浓度组,采用MTT噻唑蓝比色法检测各组作用24、48、72h后,卵巢癌SKOV-3细胞的增殖情况；取对照组和DHA 20、40、80u mol/L三个浓度组,作用24小时后,用PI单染流式细胞仪法分析细胞周期的分布；同时用免疫细胞化学染色法检测凋亡抑制蛋白Survivin及效应蛋白Caspase-3的表达情况。结果DHA对SKOV-3细胞的生长抑制率与DHA浓度和作用时间相关(P＜0.05),DHA浓度最低(5μmol/ml)、作用时间最短(24h)时抑制率为1.2%,DHA浓度最高(80μmol/ml)、作用时间最长(72h)时,抑制率为69.5%,DHA作用24、48、72 h的IC50值分别为74.25、60.74、34.16μmol/L。FCM细胞周期分析显示DHA作用SKOV-3细胞24小时后,G0/G1期细胞比率与DHA浓度(0,20,40,80μmol/L)呈负相关,而各浓度组S期细胞比率变化相对较小,G2／M期细胞比率与DHA浓度(0,20、40,80μmol/L)呈正相关。免疫细胞化学染色法结果示DHA作用24小时后凋亡抑制蛋白Survivin在细胞质内的表达减弱,而效应蛋白Caspase-3在细胞质内表达增强。结论DHA能有效抑制卵巢癌SKOV-3细胞的增殖,具有较明显的药物浓度、作用时间依赖关系；DHA处理后细胞周期被阻滞在G2/M期,抑制了细胞的有丝分裂；DHA可能通过下调凋亡抑制蛋白Survivin的表达,上调其效应蛋白Caspase-3的表达,诱导SKOV-3细胞凋亡。