中草药葫芦巴籽中薯蓣皂苷和脂肪酸酯的提取与纯化

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中草药葫芦巴广泛应用于食品与生物医药领域,薯蓣皂苷是葫芦巴中一种皂苷成分,其母体薯蓣皂苷元是激素药物合成的基础原料之一。多年来,在全球范围内一直处于供不应求的状态。目前,市售的薯蓣皂苷元多是由合成方法得到的。由于原料价格高,生产工艺复杂,合成成本高居不下。从葫芦巴等药材中提取,受技术限制,难以得到高纯度的产品。近年来,脂肪酸酯的药用价值也越来越显著。由于葫芦巴中含有大量的ω-3、ω-6及ω-9型不饱和脂肪酸,使其在食品、保健品以及医药领域都有很好的应用价值。针对物质的性质和市场需求状况,本论文开展从葫芦巴中提取薯蓣皂苷及不饱和脂肪酸酯的方法研究,以期开发出可以产业化应用的工艺方法。为了获得有效从葫芦巴中提取薯蓣皂苷和不饱和脂肪酸酯的工艺条件,本文从三个方面开展研究工作:(1)葫芦巴中提取薯蓣皂苷和脂肪酸酯最佳工艺条件确定;(2)薯蓣皂苷纯化方法研究;(3)不饱和脂肪酸酯纯化方法研究。具体开展的工作和取得成果如下:用超声辅助索氏提取法提取薯蓣皂苷及脂肪酸酯。研究超声时间、温度、液固比、提取温度和时间5个因素对薯蓣皂苷及脂肪酸酯产率的影响。通过单因素和响应面分析方法得到提取薯蓣皂苷最佳的工艺条件:前处理超声温度35℃;时间60 min;索氏提取最佳条件:液固比8:1(m L:g);提取时间8 h;温度80℃;提取得率达到0.82%。通过单因素实验得到提取脂肪酸酯最佳工艺条件:前处理超声温度30℃;超声时间30 min;液固比8:1(m L:g);提取时间5 h;温度80℃为最佳工艺条件,提取得率6.67%。采用大孔吸附树脂对薯蓣皂苷进行初步纯化,除去大量的黄酮、多糖和色素等杂质。再应用柱层析纯化薯蓣皂苷,洗脱剂为正己烷:乙酸乙酯4:1,收集流出液进行HPLC分析。经~1HNMR确定为纯度较高的薯蓣皂苷,其熔点为275.7℃。研究了尿素包埋纯化不饱和脂肪酸酯的工艺条件,通过单因素和响应面分析方法得到纯化不饱和脂肪酸酯最佳工艺条件:醇脲比60:1;脲酯比3:1;包合时间12 h;包合温度-8℃。脂肪酸酯的产率达到46.95%,脂肪酸酯纯度达到99.98%。经~1HNMR确定脂肪酸酯以甘油酯的形式共存。
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