Ghrelin对急性重症胰腺炎的影响及机制研究

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目的:建立大鼠重型胰腺炎(SAP)动物模型,证实模型成功,观察重型胰腺炎(SAP)动物模型血清Ghrelin的变化,进而应用Ghrelin对SAP进行治疗,检测IL-6、TNF-α以及NF-κB、IκBα等,探讨Ghrelin治疗重型胰腺炎的可能机制。方法:将24只Wistar大鼠分为两个实验组:SAP模型组和假手术对照组,各12只。SAP模型组采用逆行胰胆管注入牛磺胆酸钠的方法建立SAP大鼠模型,假手术对照组除不注射牛磺胆酸钠外,余同模型组。术后均给予生理盐水(NS)注射液补液治疗。术后24h麻醉下留取血样本后处死,留取胰腺,测定大鼠血清淀粉酶、TNF-α、IL-6、Ghrelin,胰腺的大体及镜下病理组织学变化来确定SAP的形成。将48只Wistar大鼠随机分为:假手术对照组、SAP模型组、Ghrelin治疗组及GHS-R拮抗剂组,每组各12只。胰腺炎模型组采用逆行胰胆管注入牛磺胆酸钠的方法建立,Ghrelin治疗组于建立大鼠SAP模型后1h腹腔内注射Ghrelin, GHS-R拮抗剂组于制模前30分钟给予[D-Lys3]GHRP-6腹腔注射,制模后1小时给予Ghrelin腹腔注射。术后24h,麻醉下留取血样本后处死大鼠,留取胰腺。测定血清淀粉酶、TNF-α、IL-6,并通过Western blot测定胰腺组织内NF-κB、p-IκBα蛋白表达。结果:①SAP模型组胰腺组织结构明显破坏,病理评分明显高于假手术对照组(P<0.01)。与假手术对照组相比,SAP模型组大鼠血清TNF-α、IL-6、AMY明显升高,有统计学意义(P<0.01)。而且SAP模型组大鼠血清Ghrelin的浓度明显高于假手术对照组。②应用Ghrelin治疗后,血清TNF-α、IL-6、AMY的水平明显降低,胰腺含水量也低于SAP模型组。胰腺病理评分也明显好于SAP模型组。③Ghrelin治疗组大鼠胰腺NF-κB的表达要明显低于SAP模型组,p-IκBα蛋白也明显低于SAP模型组。GHS-R拮抗剂组大鼠胰腺NF-κB、p-IκBα与SAP模型组无统计学差异。结论:①本方法诱发的大鼠SAP模型是成功的,而且SAP模型组大鼠血清Ghrelin的浓度明显增高。②Ghrelin治疗后大鼠血清TNF-α、IL-6、AMY的水平明显下降,胰腺的病理损害也明显减轻,证明Ghrelin对SAP具有治疗作用③Ghrelin与GHS-R结合后,可以抑制IκBα的磷酸化,从而抑制NF-κB的活化,减少下游转录产物炎性细胞因子的释放,减轻胰腺损害。GHS-R拮抗剂可以明显抑制Ghrelin的这种生物学作用。
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