表皮生长因子（epidermal growth factor,EGF）家族作为配体与人类表皮生长因子受体（human epidermal growth factor receptor,HER）胞外区特异性结合后会产生受体多肽的构象变化,从而刺激HER同源或异源二聚体产生,并通过活化自身的蛋白激酶,把细胞外的信息传递到细胞中,进而利用级联反应激活下游的Ras/MAPK、PI3K/AKT或PLC/PKC等信号通路、最终启动细胞核内相关对应的靶基因表达、行使不同的生物学功效。在众多EGF中,表皮调节素（Epiregulin,EREG）作用受体更多、受体持续激活时间更长、促有丝分裂活性更高;同时,EREG表达或活性的增加对人类恶性肿瘤的发生发展具有潜在作用,因此,研究者们在其更广谱的作用受体和更强大的生物活性投入了关注。本研究以抗表皮调节素EREG可溶性单链抗体为主要研究对象,首先通过氨基酸结构设计、基因工程技术构建p ET28a-EscFv重组载体;再依据多种促溶策略以p ET28a-EscFv重组载体为模板构建p ET32a-EscFv、p ET28a-MBP-EscFv、p ACYCDuet1-Trx-EscFv重组载体和建立分子伴侣质粒p G-KJE8与p ET28a-EscFv共表达体系;而后,经异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和菌种裂解筛选不同促溶策略得到的可溶性蛋白的占比,确定了最佳的EscFv单链抗体（the Single-Chain Variable Fragment against Human Epiregulin）在大肠杆菌中的可溶性表达策略,即伴侣质粒p G-KJE8/p ET28a-EscFv共表达,得到的可溶性单链抗体是原始p ET28a-EscFv单独表达的2.0倍。最终,利用亲和层析技术分离纯化得到EscFv单链抗体;以酶联免疫吸附测定（ELISA）和CCK-8技术鉴定EscFv单链抗体能特异性识别并中和靶标表皮调节素EREG,再以CCK-8技术检测U87和U251肿瘤细胞的细胞增殖实验中显示出EscFv单链抗体的抗肿瘤活性。综上,本研究以抗表皮调节素EREG单链抗体在大肠杆菌中最佳的的可溶性表达策略,制备出了抗表皮调节素EREG可溶性单链抗体,并鉴定了EscFv单链抗体的中和活性和体外抗肿瘤活性。为以后研究EREG及其相关Erb B信号转导在恶性肿瘤中的作用机制提供有力的工具,也为开发抗体类靶向药物奠定基础。