论文部分内容阅读
背景： 他克莫司（FK506）属大环内酯类抗生素，具有很强的免疫抑制活性，是一种广泛应用的免疫抑制剂，主要用于器官移植术后预防排斥反应。但他克莫司治疗窗窄，药物代谢个体差异大，而这些差异与药物相关基因的变异有密切关系，研究基因变异与血药浓度的关联以指导个体化用药意义重大。目前国内外对CYP3A4、CYP3A5和MDR1基因多态性与他克莫司药代动力学的相关性展开了较为广泛的研究，但仅明确了CYP3A5*3基因多态性对他克莫司的影响，其他基因多态性对FK506的影响尚未得到一致的结论。Ⅱ相代谢酶也参与了他克莫司的代谢过程，但目前对相关的基因多态性与他克莫司药代动力学的相关性的研究极少，本次实验将综合分析 CYP3A5*3、SLCO1B1*1b、SLCO1B1*5、UGT1A1*6、UGT1A1*28、UGT2B7*2、UGT2B7*3基因多态性以及患者一般基础情况（包括性别、年龄、体重、血肌酐、AST）对他克莫司血药浓度的影响，筛选出有统计学意义的影响因素，建立他克莫司血药浓度的预测模型。 第一章：筛选出可能与FK506血药浓度相关的基因影响因素 目的： 探讨CYP3A5*3、SLCO1B1*1b、SLCO1B1*5、UGT1A1*6、UGT1A1*28、UGT2B7*2、UGT2B7*3基因多态性对他克莫司血药浓度的影响，以期发现影响他克莫司血药浓度的遗传因素，为临床制定个体化治疗方案提供依据。 方法： 采用实时荧光定量 PCR 方法和 TaqMan 基因分型技术测定CYP3A5*3、SLCO1B1*1b、SLCO1B1*5、UGT1A1*6、UGT1A1*28、UGT2B7*2、UGT2B7*3基因多态性.应用SPSS19.0软件进行统计学分析。 结果： 在124例样本中，测得CYP3A5*3的基因型AA/AG/GG为8.9%/48.4%/42.7%，等位基因A和G的频率分别为33.1%、66.9%。SLCO1B1*1b的基因型CC/CT/TT为59.7%/34.7%/5.6%，等位基因C和T的频率分别为77.0%、23.0%。SLCO1B1*5的基因型TT/CT/CC为79.8%/17.8%/2.4%，等位基因T和C的频率分别为88.7%、11.3%。UGT1A1*6的基因型GG/AG/AA为77.4%/21.0%/1.6%，等位基因G和A的频率分别为87.9%、12.1%。UGT1A1*28的基因型 (TA) 6 (TA) 6/ (TA) 6 (TA) 7/(TA) 7 (TA) 7为71.0%/26.6%/2.4%，等位基因 (TA) 6和 (TA) 7的频率分别为84.3%、15.7%。UGT2B7*2基因型TT/CT/CC为6.5%/44.3%/49.2%，等位基因T和C的频率分别为28.6%和71.4%。UGT2B7*3的基因型GG/GT/TT为27.4%/25.8%/47.8%，等位基因G和T的频率分别为40.3%和59.7%。 CYP3A5*3突变型的FK506血药浓度（GG/AG:7.75 ± 2.56/ 6.75 ± 1.85ng/mL ）显著高于野生型（ AA:5.00 ± 1.81 ng/mL ） ，统计结果有统计学意义（P<0.01）。UGT1A1*6基因型GG/AG/AA的血药浓度7.15 ± 2.72/6.74 ± 1.81/4.45 ± 0.49 ng/mL，差异有统计学意义(p=0.022)。UGT2B7*3基因型的血药浓度为GG/GT/TT：7.00 ± 1.95/7.48 ± 2.22/6.78 ± 3.00 ng/mL，差异有统计学意义 (p=0.014) 。UGT1A1*28基因型的血药浓度为 (TA) 6 (TA) 6/(TA) 6 (TA) 7/(TA) 7 (TA) 7：7.00 ± 2.13/7.08 ± 3.55/7.02 ± 1.22 ng/mL，差异无统计学意义(p=0.927) 。UGT2B7*2基因型的血药浓度为TT/TC/CC：6.81 ± 1.78/6.9 ± 3.073/7.16 ± 2.11ng/mL，差异无统计学意义 (p=0.566) 。SLCO1B1*1b、SLCO1B1*5的基因型对应的FK506血药浓度经统计分析也无显著性差异，无统计学意义，P值分别为p=0.669和p=0.491。 结论： CYP3A5*3、UGT1A1*6、UGT2B7*3基因多态性与FK506剂量校正浓度有显著的相关性，SLCO1B1*1b、SLCO1B1*5、UGT1A1*28、UGT2B7*2的基因多态性与FK506体重剂量校正浓度之间没有相关性。 第二章 建立他克莫司血药浓度预测模型 目的： 在第一部分研究结果的基础上，结合患者一般基础情况资料（包括包括性别、年龄、体重、血肌酐、AST）与他克莫司血药浓度的相关性，在充分考虑到患者的遗传因素和病理生理基础上，建立他克莫司血药浓度的预测模型，以期为下一步指导临床使用他克莫司提供帮助。 方法： 采用SPSS19.0统计软件，先筛选出有意义的遗传和病理生理相关的影响因素，再采用多重线性回归方法建立他克莫司血药浓度的预测模型。 结果： 成功建立他克莫司血药浓度预测模型：他克莫司血药浓度Co=Co=1.029+1.604 CYP3A5*3+1.493UGT2B7*3-1.113 UGT1A1*6。该模型拟合度为R2=0.181。 结论： CYP3A5*3和UGT2B7*3基因多态性与他克莫司血药浓度呈正相关， UGT1A1*6与他克莫司血药浓度呈负相关。