柴胡皂甙d对小鼠肺纤维化的作用及机制研究

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目的:柴胡皂甙d(SSd)是中药柴胡的主要有效成分,具有皮质酮激素的作用、抗血小板活性因子的功效及免疫调节作用。本实验研究通过博来霉素诱导的小鼠肺纤维化模型来观察SSd抗肺间质纤维化的作用,并探讨其作用机制。方法:将180只小鼠按随机数字表法分为5组。其中四组为博来霉素诱导肺纤维化模型组(气管内注射BLM 5mg·kg-1 0.1ml),分别为单纯造模组(BLM组)、地塞米松干预组(DXM组)、SSd干预组(SSd组)和SSd+DXM联合干预组(SSd+DXM组),每组40只;造模后1h,后3组小鼠分别腹腔注射DXM 5mg·kg-1(0.1ml)、SSd 1.8mg·kg-1(0.18ml)、SSd+DXM(0.28ml),BLM组腹腔注射等体积生理盐水,每天1次,连续28d。另1组为正常对照组(NC组,20只),同时间按同样方法注入等体积生理盐水。给药第3、7、14、28天每组分别各处死5只小鼠,取肺组织行常规组织病理学观察,检测肺组织中羟基脯氨酸(HYP)、层粘连蛋白(LN)、转化生长因子-1(TGF-β1 mRNA)含量;肺组织及外周血中的丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)的活性及组织纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)的活性。结果:(1)与BLM组相比,SSd可以明显提高纤维化小鼠生存率,并显著减轻小鼠早期肺泡炎和晚期肺纤维化程度。(2)BLM组与NC对照组相比,肺组织中羟基脯氨酸含量第7天开始上升,第14天上升最快,第28天达到峰值;在第14天和28天时,DXM组、SSd组及SSd+DXM组,与BLM组对照,均有显著差异,但是三种治疗组间差异无统计学意义。(3)LN在正常肺组织中有少量表达,经BLM造模后,第7天LN开始增加,第14天时更加明显,第28天肺泡隔及上皮细胞内LN含量达到高峰。三个治疗组较BLM组LN显著降低,但是治疗组之间LN含量差异不明显。(4)与NC对照组比较,BLM组第3天肺组织匀浆及血清中SOD含量显著下降,第7天达最低值,14天升高,第28天逐步恢复正常值;与BLM组对照,在第3天和第7天,DXM组、SSd组及SSd+DXM组,肺组织匀浆SOD含量升高有显著性差异;与DXM组比较,肺组织匀浆SOD含量差异无统计学意义;在第7天SSd组及SSd+DXM组血清SOD含量变化有显著差异。(5)与NC组比较,BLM组肺匀浆及血清MDA含量第3天显著升高,第14天达峰值,第28天又逐步降低;与BLM组相比,DXM组、SSd组和SSd+DXM组,肺匀浆含量MDA含量有显著差异,但是三个治疗组间MDA含量差异无统计学意义。(6)与NC组比较,BLM组TGF-β1含量第3天时无显著变化;第7天时小鼠肺组织的TGF-β1含量较正常明显升高,各治疗组明显低于BLM组;直到28天,各组小鼠肺组织的TGF-β1含量仍呈上升趋势,而各治疗组均低于BLM组,差异均有显著性意义。三个治疗组间,差异无显著性意义。(7)与NC对照组比较,BLM组肺纤维化小鼠肺组织及血清PAI-1含量自第7天起升高,第28天时达到峰值。与BLM组比较,第14、28天时,DXM组、SSd组以及DXM+SSd组小鼠肺PAI-1含量显著降低。与DXM组相比较,第28天时DXM+SSd组小鼠血清PAI-1含量显著降低。结论:SSd对小鼠实验性肺纤维化具有明显的保护作用,作用机制可能与抗脂质过氧化及抗凝,抗血管生成,改善纤溶状态以及抑制TGF-β1 mRNA的表达有关。
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