论文部分内容阅读
目的Obg样ATP酶1(Obg-like ATPase 1,OLA1),是独立于转录过程的细胞抗氧化反应的负性调控因子。前期研究发现OLA1在结肠癌生长发展中有重要作用。炎症性肠病((inflammatory bowel disease,IBD)常被认为是结直肠癌的一种癌前病变,OLA1在IBD的发生中是否发挥作用目前尚不明确。研究内容与方法本研究纳入了于2015-2017年在浙江大学医学院附属第二医院行手术治疗、并通过临床及病理确诊为IBD的患者62例。诊断-手术的时间(diagnosis-to-surgery time,DST)定义为从首次诊断到手术的时间间隔。采用单因素和多因素Cox回归分析临床病理变量与DST的关系。采用免疫组织化学染色方法检测IBD患者非炎症病变肠段和炎症病变肠段肠上皮细胞中OLA1的表达情况,并采用配对样本的非参数边缘同质性检验(Non-parametric Marginal Homogeneity test)比较两者之间的差异。OLA1与其他临床指标的相关性分析采用Spearman相关分析方法。所有检验均为双侧检验,p<0.05认为差异有统计学意义。采用Cre-Loxp基因敲除技术构建肠道特异性OLA1敲除的转基因小鼠模型,并通过聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)技术验证小鼠的基因型。为后续构建葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)诱导的小鼠结肠炎模型做准备。研究结果1.单因素Cox回归分析结果显示,年龄、性别和体重指数与克罗恩病(Crohn’s disease,CD)患者的DST相关(p<0.05)。基于多因素Cox回归分析结果:≥35岁(与<35岁者相比;危险比[hazard ratio,HR],0.368;95%置信区间[confidence interval,CI],0.179-0.756;p=0.007)和体重指数≥18.5 kg/m2的CD患者(与体重指数<18.5 kg/m2者相比;HR,0.485;95%CI,0.257-0.915;p=0.025)的DST相对较长;男性CD患者(与女性患者相比;HR,2.248;95%CI,1.127-4.483;p=0.021)的DST相对较短。2.IBD患者炎症病变肠段肠上皮细胞中OLA1表达较非炎症病变肠段高(p=0.015)。炎症病变肠段肠上皮细胞中OLA1表达阳性的CD患者中,较年轻者(<35岁)居多,占70%(p=0.032)。3.IBD患者炎症病变肠段肠上皮细胞中OLA1表达情况与血沉呈负相关(相关系数=-0.312,p=0.015)。4.成功构建了肠道特异性OLA1敲除的转基因小鼠,为后续IBD小鼠模型的建立提供基础。结论1.OLA1可能与IBD的发生有关,而与IBD的进展情况没有相关性。2.构建了肠道特异性OLA1敲除的转基因小鼠模型,为进一步探究活体内OLA1在IBD中乃至在IBD相关结直肠癌(inflammatory bowel disease related colorectal,IBD-CRC)发生发展中的作用做准备。