西瓜枯萎病生防细菌筛选及其防治作用的研究

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西瓜枯萎病是西瓜的主要病害,严重影响西瓜的产量,本文从我国的西瓜生产实际出发,从连作的西瓜田块、黄瓜和茄子等园艺作物根际土壤和病健组织中分离筛选对西瓜枯萎病有防治效果的拮抗菌株,对拮抗菌株的温室防病效果、田间防效以及分类鉴定进行了研究,并初步研究了拮抗菌株的拮抗机理,以期通过生物学途径改良设施连作土壤和控制蔬菜土传病害提供依据。主要结果如下:(1)从内蒙古、新疆、安徽、河南、江苏、江西6省的西瓜、黄瓜和茄子3种作物根际土壤和病健组织中,共获得样本64份,分离得到细菌1055株,其中病土中分离出的最多。通过平板对峙培养,室内抑菌活性测定结果表明:9株细菌分离物对西瓜枯萎病菌Fusarium oxysporum f. sp. niveum、甘蓝黑斑病菌Alternaria brassicicola、辣椒疫霉病菌Phytophthora capsici和番茄灰霉病菌Botrytis cinerea均具有很强的拮抗作用,其中菌株NBT-15和PL-82对西瓜枯萎病菌菌丝生长的抑制作用比较明显,抑制率分别为60.5%和55.3%。(2)根据上述结果选择9个生防细菌进行温室试验,结果表明:NBT-15和PL-82对西瓜枯萎病的防治效果分别为80.4%和75.6%。在田间试验中,NBT-15和PL-82两株菌的防治效果依然很好,防治效果分别为70.05%和50.43%,NBT-15的防治效果要大于B-916,它们不仅对西瓜枯萎病具有防治作用,并且能够促进西瓜的生长。(3)对筛选出的两株防病促生效果明显的菌株进行了拮抗机理的研究:结果表明,二者都能够分泌一些降解细胞壁的酶类,NBT-15能够产生纤维素酶和嗜铁素,而PL-82能够产生蛋白酶和嗜铁素,说明其产生的蛋白酶、纤维素酶、嗜铁素等在抗真菌上发挥了一定得作用。利用抗利福平标记法研究拮抗芽孢杆菌NBT-15在土壤及西瓜根部的定殖情况。结果表明,拮抗菌株NBT-15能够在土壤中定殖至少27天,但随着时间的延长土壤中定殖的拮抗细菌菌量呈下降趋势,而在西瓜根际菌量的下降则很缓慢。防治时需要在第15d时再加强浇灌一次该菌能起到很好的效果。(4)利用形态学鉴定、生理生化特性鉴定及细菌的16S rDNA序列分析结果相结合的方法,分别将菌株NBT-15和PL-82鉴定为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis和铜绿假。单胞菌杆菌Pseudomonas aeruginosa,基因库中两菌株的序列登录号分别为HQ244501和HQ259594。
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